24小时热门版块排行榜    

查看: 1117  |  回复: 8

zhao_student

新虫 (小有名气)

[交流] PCR产物 已有6人参与

PCR产物中出现杂带的原因是什么?PCR电泳有条带,但是大小不对怎么回事儿?

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王绪朋

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-09-05 08:11:55
如果引物设计没问题的话,就是非特异性扩增了,可能退火温度有点低,一般比Tm低5度左右。

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-09-05 01:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongbaojiang

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
很可能是引物有问题!

发自小木虫Android客户端
3楼2016-09-05 22:07:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangtao2010

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提取物有杂质,不纯
4楼2016-09-06 11:45:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by huangtao2010 at 2016-09-06 11:45:12
提取物有杂质,不纯

模版应该是没有问题

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-09-07 05:23:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 王绪朋 at 2016-09-05 01:28:25
如果引物设计没问题的话,就是非特异性扩增了,可能退火温度有点低,一般比Tm低5度左右。

很对!

发自小木虫IOS客户端
6楼2016-09-07 05:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

534720018

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果条带不单一特异性不好,可能是引物的问题,可以试一下梯度;如果吊带单一且特异性良好,也是有这种情况滴…

发自小木虫IOS客户端
7楼2016-09-07 18:33:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MIDNA

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也遇到了同样的问题,也有可能是你的引物没有加合适,注意引物交叉污染或者重复添加引物!
默默搜寻
8楼2016-09-08 00:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

仇峰12306

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一个是你引物的特异性不好,设计的时候错配了;还有就是你PCR时退火温度是不是太低了。大小不对很有可能是引物的问题。仅供参考
9楼2016-09-08 08:43:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhao_student 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见