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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物
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zhao_student

新虫 (小有名气)

[交流] PCR产物 已有6人参与

PCR产物中出现杂带的原因是什么？PCR电泳有条带，但是大小不对怎么回事儿？

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1楼 2016-09-04 21:43:43
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王绪朋

金虫 (小有名气)
★ ★
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xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-09-05 08:11:55
如果引物设计没问题的话，就是非特异性扩增了，可能退火温度有点低，一般比Tm低5度左右。

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2楼2016-09-05 01:28:25
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hongbaojiang

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很可能是引物有问题！

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3楼2016-09-05 22:07:56
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huangtao2010

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提取物有杂质，不纯
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4楼2016-09-06 11:45:12
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zhao_student

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huangtao2010 at 2016-09-06 11:45:12
提取物有杂质，不纯

模版应该是没有问题

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5楼2016-09-07 05:23:33
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zhao_student

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王绪朋 at 2016-09-05 01:28:25
如果引物设计没问题的话，就是非特异性扩增了，可能退火温度有点低，一般比Tm低5度左右。

很对！

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6楼2016-09-07 05:24:01
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534720018

至尊木虫 (著名写手)
★
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如果条带不单一特异性不好，可能是引物的问题，可以试一下梯度；如果吊带单一且特异性良好，也是有这种情况滴…

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7楼2016-09-07 18:33:09
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MIDNA

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到了同样的问题，也有可能是你的引物没有加合适，注意引物交叉污染或者重复添加引物！
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默默搜寻
8楼2016-09-08 00:49:14
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仇峰12306

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一个是你引物的特异性不好，设计的时候错配了；还有就是你PCR时退火温度是不是太低了。大小不对很有可能是引物的问题。仅供参考
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9楼2016-09-08 08:43:59
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