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千里两句

新虫 (小有名气)
15%的tricine gel，不要跑过，也没有必要加一层，浓缩胶分离胶两层就可以了

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21楼2016-09-03 18:45:14
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chen5805

至尊木虫 (职业作家)

资深木虫
引用回帖:
5楼: Originally posted by 千里两句 at 2016-09-03 18:10:43

女生字？

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22楼2016-09-04 11:02:06
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ls5940

铁虫 (初入文坛)
可以不做三层的胶，两层足已，而且你的marker不合适，有更小的

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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
23楼2016-09-04 11:42:09
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包晓明

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
23楼: Originally posted by ls5940 at 2016-09-04 11:42:09
可以不做三层的胶，两层足已，而且你的marker不合适，有更小的

恩，我试试吧
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24楼2016-09-04 14:26:32
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yl火焰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
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19楼: Originally posted by 包晓明 at 2016-09-03 18:43:06
我透析后的样品应该没有问题，就是纯化的蛋白有杂带，但是我的目的蛋白太小了，即使切下来我也不一定能跑出来，现在只能做一次western看看了，但是western不知道用什么胶...

western的话，tricine gel 会好一点吧  毕竟3kD小分子，很容易跑出来的  Ab:His/目标蛋白   酶切前后样品
另 你这个tricine gel 是CBB染色?   silver staining 也可以考虑一下。  看你的图  好像是没切开，没这样搞过，不了解这个酶

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25楼2016-09-04 17:15:25
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yl火焰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
25楼: Originally posted by yl火焰 at 2016-09-04 17:15:25
western的话，tricine gel 会好一点吧  毕竟3kD小分子，很容易跑出来的  Ab:His/目标蛋白   酶切前后样品
另 你这个tricine gel 是CBB染色?   silver staining 也可以考虑一下。  看你的图  好像是没切开，没这样搞 ...

当然透析可能影响后面的酶切  除盐的话，也可以用丙酮沉淀，或者2D clean-up kit

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26楼2016-09-04 17:25:58
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包晓明

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
26楼: Originally posted by yl火焰 at 2016-09-04 17:25:58
当然透析可能影响后面的酶切  除盐的话，也可以用丙酮沉淀，或者2D clean-up kit
...

透析液选用哪个比较好呢？我之前一次用的Tris-Hcl，是常温透析的，透析完是透明的，后一次用的灭菌水，4℃冰箱，透析完是有点乳白色的，但是后来放冰箱-20℃冻过之后拿出来用好像还是透明的，跑胶也是有我的目的条带的，但是不知道对我的蛋白有没有什么影响？
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27楼2016-09-04 20:11:26
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包晓明

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
25楼: Originally posted by yl火焰 at 2016-09-04 17:15:25
western的话，tricine gel 会好一点吧  毕竟3kD小分子，很容易跑出来的  Ab:His/目标蛋白   酶切前后样品
另 你这个tricine gel 是CBB染色?   silver staining 也可以考虑一下。  看你的图  好像是没切开，没这样搞 ...

请问你有跑过Tricine的胶吗？我的跑出来线总是压不平，而且下面还是糊的，感觉跟16%的SDS-PAGE差不多
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28楼2016-09-04 20:14:03
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李勋111

铁杆木虫 (职业作家)
Tricine-SDS-PAGE电泳缓冲液阴极和阳极是怎么回事？
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29楼2016-11-20 21:16:43
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18235412354

新虫 (初入文坛)
您好 我的条带跑开都是花的 ，您的都比较平整 有没有什么建议，或者您用的什么试剂盒呢？
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30楼2017-03-19 21:07:39
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