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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电化学传感器 » 从SIGMA 买的T6884-100UN的thrombin要怎么稀释？
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114110050

铁虫 (正式写手)

[求助] 从SIGMA 买的T6884-100UN的thrombin要怎么稀释？ 已有1人参与

求大家帮忙。从SIGMA 买的T6884-100UN的thrombin (from human plasma) 要怎么稀释? 用什么Buffer? 用多少Buffer稀释到多大浓度合适? 它的单位怎么由U换算到浓度单位mol/L?
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1楼 2016-08-31 21:19:44
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olea

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

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louderbe: 金币+1 2016-09-01 11:51:30
114110050: 金币+5, 谢谢啦！ 2016-09-01 14:48:18
我用的是PBS，稀释到多少浓度看你想测多少浓度，最大浓度的100倍左右就行，小浓度使用的时候逐级稀释。
买的有写活性大于多少U/mg，根据你买的100U，大致得到质量mg，再根据分子量大概在36000左右，得到摩尔量。
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2楼2016-09-01 09:32:12
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olea

专家顾问 (著名写手)
sigma有说明的，1 NIH unit = 0.324 ±0.073 μg，一个vial是133 NIH，就是43ug左右，除以分子量36000，差不多一共1.2 nmol，按比例稀释就行。
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4楼2016-09-01 16:05:27
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114110050

铁虫 (正式写手)
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2楼: Originally posted by olea at 2016-09-01 09:32:12
我用的是PBS，稀释到多少浓度看你想测多少浓度，最大浓度的100倍左右就行，小浓度使用的时候逐级稀释。
买的有写活性大于多少U/mg，根据你买的100U，大致得到质量mg，再根据分子量大概在36000左右，得到摩尔量。

太谢谢您了。还有个地方不太清楚，向您请教哈。我买的药品上写着T6884-100 UN. lyophilized powder, >2,000 NIH units/mg protein (E%/280,18.3), 133 NIH units/vial; 2582 NIH units/mg protein. 您说的活性大于多少U/mg是我这里药品上写的>2,000 NIH units/mg protein这个吗？如果我要计算是不是就用(2,000 U/mg X 100 U) / 36000这个式子计算呀？ 这里计算的时候需不需要换算单位？谢谢您了！
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3楼2016-09-01 14:47:03
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114110050

铁虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by olea at 2016-09-01 16:05:27
sigma有说明的，1 NIH unit = 0.324 ±0.073 μg，一个vial是133 NIH，就是43ug左右，除以分子量36000，差不多一共1.2 nmol，按比例稀释就行。

好的，真的太谢谢您了！
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5楼2016-09-01 20:33:12
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雪千寻丶

新虫 (初入文坛)
亲，有个问题问一下133 NIH units/vial这个是在哪里看到的哦
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6楼2016-09-01 23:19:59
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114110050

铁虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by 雪千寻丶 at 2016-09-01 23:19:59
亲，有个问题问一下133 NIH units/vial这个是在哪里看到的哦

我是在买回来的药品瓶子上看到的。
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7楼2016-09-02 15:02:58
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雪千寻丶

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 114110050 at 2016-09-02 15:02:58
我是在买回来的药品瓶子上看到的。...

昨天看T6884-100UN的产品说明 那里面写的Molecular mass : 37.4 kDa
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8楼2016-09-02 16:20:50
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114110050

铁虫 (正式写手)
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8楼: Originally posted by 雪千寻丶 at 2016-09-02 16:20:50
昨天看T6884-100UN的产品说明 那里面写的Molecular mass : 37.4 kDa...

亲是在哪里看到的呀？我们一直都将凝血酶的分子量看为36000，我查的一些资料上说的也是36000，希望我没有弄错
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9楼2016-09-02 20:49:49
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雪千寻丶

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by 114110050 at 2016-09-02 20:49:49
亲是在哪里看到的呀？我们一直都将凝血酶的分子量看为36000，我查的一些资料上说的也是36000，希望我没有弄错...

http://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma/Product_Information_Sheet/1/t6884pis.pdf你看一下···
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10楼2016-09-03 13:49:13
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