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114110050

铁虫 (正式写手)

[求助] 从SIGMA 买的T6884-100UN的thrombin要怎么稀释? 已有1人参与

求大家帮忙。从SIGMA 买的T6884-100UN的thrombin (from human plasma) 要怎么稀释? 用什么Buffer? 用多少Buffer稀释到多大浓度合适? 它的单位怎么由U换算到浓度单位mol/L?
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olea

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
louderbe: 金币+1 2016-09-01 11:51:30
114110050: 金币+5, 谢谢啦! 2016-09-01 14:48:18
我用的是PBS,稀释到多少浓度看你想测多少浓度,最大浓度的100倍左右就行,小浓度使用的时候逐级稀释。
买的有写活性大于多少U/mg,根据你买的100U,大致得到质量mg,再根据分子量大概在36000左右,得到摩尔量。
2楼2016-09-01 09:32:12
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olea

专家顾问 (著名写手)

sigma有说明的,1 NIH unit = 0.324 ±0.073 μg,一个vial是133 NIH,就是43ug左右,除以分子量36000,差不多一共1.2 nmol,按比例稀释就行。
4楼2016-09-01 16:05:27
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114110050

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by olea at 2016-09-01 09:32:12
我用的是PBS,稀释到多少浓度看你想测多少浓度,最大浓度的100倍左右就行,小浓度使用的时候逐级稀释。
买的有写活性大于多少U/mg,根据你买的100U,大致得到质量mg,再根据分子量大概在36000左右,得到摩尔量。

太谢谢您了。还有个地方不太清楚,向您请教哈。我买的药品上写着T6884-100 UN. lyophilized powder, >2,000 NIH units/mg protein (E%/280,18.3), 133 NIH units/vial; 2582 NIH units/mg protein. 您说的活性大于多少U/mg是我这里药品上写的>2,000 NIH units/mg protein这个吗?如果我要计算是不是就用(2,000 U/mg X 100 U) / 36000这个式子计算呀? 这里计算的时候需不需要换算单位?谢谢您了!
3楼2016-09-01 14:47:03
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114110050

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by olea at 2016-09-01 16:05:27
sigma有说明的,1 NIH unit = 0.324 ±0.073 μg,一个vial是133 NIH,就是43ug左右,除以分子量36000,差不多一共1.2 nmol,按比例稀释就行。

好的,真的太谢谢您了!
5楼2016-09-01 20:33:12
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雪千寻丶

新虫 (初入文坛)

亲,有个问题问一下133 NIH units/vial这个是在哪里看到的哦
6楼2016-09-01 23:19:59
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114110050

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 雪千寻丶 at 2016-09-01 23:19:59
亲,有个问题问一下133 NIH units/vial这个是在哪里看到的哦

我是在买回来的药品瓶子上看到的。
7楼2016-09-02 15:02:58
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雪千寻丶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 114110050 at 2016-09-02 15:02:58
我是在买回来的药品瓶子上看到的。...

昨天看T6884-100UN的产品说明 那里面写的Molecular mass : 37.4 kDa
8楼2016-09-02 16:20:50
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114110050

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 雪千寻丶 at 2016-09-02 16:20:50
昨天看T6884-100UN的产品说明 那里面写的Molecular mass : 37.4 kDa...

亲是在哪里看到的呀?我们一直都将凝血酶的分子量看为36000,我查的一些资料上说的也是36000,希望我没有弄错
9楼2016-09-02 20:49:49
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雪千寻丶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 114110050 at 2016-09-02 20:49:49
亲是在哪里看到的呀?我们一直都将凝血酶的分子量看为36000,我查的一些资料上说的也是36000,希望我没有弄错...

http://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma/Product_Information_Sheet/1/t6884pis.pdf你看一下···
10楼2016-09-03 13:49:13
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