应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白质组学实验的多肽酶解物要过10K滤膜吗？
121/1返回列表
查看: 1602  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jiafeijiafei

金虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质组学实验的多肽酶解物要过10K滤膜吗？

我最近在做蛋白质质谱，提取的蛋白跑SDS-PAGE，银染脱色，还原烷化，酶解，提取酶解物，冻干，复溶进质谱。我看有的文献说在提取酶解物之后冻干之前要进10K滤膜。不知道过10K滤膜的作用和意义是什么，过滤膜之后多肽不会有损失吗？哪个牌子的好用一些呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2016-08-30 12:39:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaofuss111

新虫 (著名写手)
★
jiafeijiafei(金币+1): 谢谢参与
非常好

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2016-08-31 08:14:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DECHIBIO

金虫 (著名写手)
★
jiafeijiafei(金币+1): 谢谢参与
10K滤膜表示分子量大小小的；你是希望把多大分子量多肽过滤掉的
赞一下 回复此楼
6楼2016-08-31 10:16:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiafeijiafei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by DECHIBIO at 2016-08-31 10:16:44
10K滤膜表示分子量大小小的；你是希望把多大分子量多肽过滤掉的

我不滤掉的，我的操作是酶解提取酶解液，我的想法是可以滤掉凝胶残渣，这样滤过液直接冻干成干粉再复溶就进液相做质谱了。我这个思路对吗？
赞一下 回复此楼
7楼2016-08-31 11:10:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王老吉2016

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这需要根据你的方案来制定的，你需要搜集的肽片段在多少的，你就选择多大的微孔滤膜，跑2-DE应该不会选择10K滤膜了。
赞一下 回复此楼
8楼2016-09-05 13:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

protemics

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
超滤主要是脱盐，去除尿素以及其他可能干扰酶活性的小分子

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-09-05 15:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiafeijiafei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 王老吉2016 at 2016-09-05 13:21:52
这需要根据你的方案来制定的，你需要搜集的肽片段在多少的，你就选择多大的微孔滤膜，跑2-DE应该不会选择10K滤膜了。

我是跑1D的PAGE胶，切胶 脱色 还原烷化 酶解，酶解后直接吸取酶解液冻干的，然后干粉复溶就进质谱的，可是我的难题就是怎么去除SDS，还有吸取酶解液之后需不需要其他处理再冻干啊

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-09-05 20:48:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiafeijiafei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by protemics at 2016-09-05 15:42:07
超滤主要是脱盐，去除尿素以及其他可能干扰酶活性的小分子

我是跑SDS PAGE胶，银染 切胶 脱色 还原烷化 酶解，酶解后直接吸取酶解液冻干的，然后干粉复溶就进质谱的，可是我的难题就是怎么去除SDS，还有吸取酶解液之后需不需要其他处理再冻干啊

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
11楼2016-09-05 20:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bwang377

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
多肽分子量较小，一般在10kDa以下~
赞一下 回复此楼
12楼2016-09-06 15:37:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
dsctg2楼
2016-08-30 12:50   回复  
jiafeijiafei(金币+1): 谢谢参与
syhorchid3楼
2016-08-30 13:26   回复  
jiafeijiafei(金币+1): 谢谢参与
slytjiaofei4楼
2016-08-31 07:21   回复  
jiafeijiafei(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 jiafeijiafei 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭