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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱分析
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青草悠悠1234

铁虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱分析 已有1人参与

各位前辈们：你们好，我第一次做多肽蛋白质标品时，出峰时间16分钟，第二次在同样条件做，出峰时间5分钟，俩次分析之间做过人参皂甙的分析，本人猜想是柱子没冲干净，用纯甲醇冲洗是出现以下图，原因是什么？
多肽分析条件：  A   水+0.1%TFA    B  乙腈+0.1%TFA
时间       0           5                20
A          80          80              30
B        20            20              70

高效液相色谱分析
P60825-164949.jpg
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1楼 2016-08-26 13:31:38
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w9412

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 青草悠悠1234 at 2016-08-31 09:59:44
这是俩次测量的叠加图。绿色图是第一次做的标品图，红色图是第二次做的没出峰的图，请您多多指教！谢谢

P60830-135654.jpg
...

一般来说不会出现第二次完全不出峰的现象，我觉得5分钟的峰不是样品峰。

两次进样时间相差多久，有没有可能样品分解或沉淀？？如果排除样品问题，那我只能怀疑仪器进样器有问题了。

应该和柱子关系不大
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液相，分析纯化，多肽蛋白
9楼2016-08-31 14:07:20
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2350

新虫 (正式写手)
个人意见，看看压力波动大不大，感觉图谱很像呢！

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-08-26 13:48:12
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w9412

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这哪里是峰啊，没有峰好吧，是不是只采集了压力？
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液相，分析纯化，多肽蛋白
3楼2016-08-26 15:00:34
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青草悠悠1234

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by w9412 at 2016-08-26 15:00:34
这哪里是峰啊，没有峰好吧，是不是只采集了压力？

嗯嗯，这是平衡的时候出现的情况，之前做一多肽时16分钟出峰，第二次条件相同，感觉不出峰，俩次测量条件相同，不知是什么原因造成的，请多多指教！图如下
高效液相色谱分析-1
P60830-135654.jpg
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4楼2016-08-31 09:35:07
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