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分子提取方法
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蛋白提取 贴壁细胞总蛋白提取 1、培养于35mm培养皿的细胞融合至80%左右。 2、细胞培养皿置于冰上，吸去培养液。 3、加入2ml预冷PBS液，洗涤细胞2-3次。 *应在冰上操作，最后尽可能吸干残留的PBS液。 4、加入100ul预冷蛋白裂解液，用细胞刮刀沿培养皿壁刮细胞。 5、用1ml移液器枪头吸刮好的细胞裂解液，放入1.5ml离心管中。 6、冰上孵育15min。 7、超生破碎。 8、4℃，15000rpm，10min。 9、取上清液，转移至新的1.5ml离心管中。 10、取少量样本进行蛋白定量，分装-80℃保存。 |
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