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静默人声412

木虫 (小有名气)

[求助] 用格里斯试剂鉴定筛选土壤中氨氧化细菌,但没有显红色菌,这是怎么回事呢?

材料:土壤
第一次用的富集培养基(NH4)SO4                  2.0g                                                  
                              NaH2PO4                      0.25g                                             
                              K2HPO4                      0.75g                                                   
                              MnSO4•4H2O               0.01g                                                
                              MgSO4•7H2O               0.03                                                            
                              CaCO3                          5.0g                                                
                                 PH               7.2                                                                          
第二次富集:(NH4)SO4                    0.5g
                    KH2PO4                         0.2g
                   GaCl2•2H2O                   0.04g
                   MgSO4•7H2O                  0.04g
                   柠檬酸铁                       0.5mg
                   NaCl                               0.85g
                  好氧氨氧化细菌显色剂:格里斯试剂5ml
                  PH8.0
富集一个月后,涂平板上几乎不长菌,长菌也无颜色变化。
固体培养基:(NH4)SO4          0.5g
                      KH2PO4             0.2g
                    GaCl2•2H2O         0.04g
                   MgSO4•7H2O         0.04g
                       柠檬酸铁          0.5mg
                        NaCl               0.85g
               好氧氨氧化细菌显色剂:格里斯试剂5ml
                         琼脂粉          15%
                       PH8.0
富集培养基也用过:(NH4)SO4          0.5g
                             KH2PO4             0.2g
                             GaCl2•2H2O         0.04g
                         MgSO4•7H2O         0.04g
                            F-EDTA           0.5mg
                           甲酚红            0.5mg
                               PH                 8.0
    未经富集的土壤直接涂布产生各种菌,只有一种菌变红,可是之后提不出DNA, 刚开始在未加格里斯试剂的培养基中,挑菌在白瓷板中再加格里斯试剂无颜色。
         反应,不知道怎样鉴定,哪位大神有跟系统的方法,求助一下!
  第一次: 格里斯试剂:甲液;0.5g磺胺酸溶于150ml30%醋酸
                                  乙液:1-萘胺0.5g加入50ml蒸馏水煮沸后全部加入150ml10%醋酸
第二次:甲液:4g苯磺酸+700ml水+300ml冰醋酸
               乙液:0.2g1-萘胺+100ml60%醋酸
但是富集之后涂平板产生的菌没有显红色的,@天使托
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