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静默人声412木虫 (小有名气)
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[求助]
用格里斯试剂鉴定筛选土壤中氨氧化细菌,但没有显红色菌,这是怎么回事呢?
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材料:土壤 第一次用的富集培养基(NH4)SO4 2.0g NaH2PO4 0.25g K2HPO4 0.75g MnSO4•4H2O 0.01g MgSO4•7H2O 0.03 CaCO3 5.0g PH 7.2 第二次富集:(NH4)SO4 0.5g KH2PO4 0.2g GaCl2•2H2O 0.04g MgSO4•7H2O 0.04g 柠檬酸铁 0.5mg NaCl 0.85g 好氧氨氧化细菌显色剂:格里斯试剂5ml PH8.0 富集一个月后,涂平板上几乎不长菌,长菌也无颜色变化。 固体培养基:(NH4)SO4 0.5g KH2PO4 0.2g GaCl2•2H2O 0.04g MgSO4•7H2O 0.04g 柠檬酸铁 0.5mg NaCl 0.85g 好氧氨氧化细菌显色剂:格里斯试剂5ml 琼脂粉 15% PH8.0 富集培养基也用过:(NH4)SO4 0.5g KH2PO4 0.2g GaCl2•2H2O 0.04g MgSO4•7H2O 0.04g F-EDTA 0.5mg 甲酚红 0.5mg PH 8.0 未经富集的土壤直接涂布产生各种菌,只有一种菌变红,可是之后提不出DNA, 刚开始在未加格里斯试剂的培养基中,挑菌在白瓷板中再加格里斯试剂无颜色。 反应,不知道怎样鉴定,哪位大神有跟系统的方法,求助一下! 第一次: 格里斯试剂:甲液;0.5g磺胺酸溶于150ml30%醋酸 乙液:1-萘胺0.5g加入50ml蒸馏水煮沸后全部加入150ml10%醋酸 第二次:甲液:4g苯磺酸+700ml水+300ml冰醋酸 乙液:0.2g1-萘胺+100ml60%醋酸 但是富集之后涂平板产生的菌没有显红色的,@天使托 |
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