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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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playboy723

金虫 (正式写手)

[交流] 请教甲基化酶的影响

各位虫友请教一个问题:  我想切一个带sma1位点的质粒,可怎么也切不开。我确保酶没有问题,因为我是新买的takara的酶,所以我怀疑是酶切位点被甲基化了,因为sma1酶切位点(cccggg)易被甲基化,现在我想请教大家的是怎么样去掉质粒上甲基化作用呢?或者我该怎么办?  谢谢大家了
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

可能是你酶切的时间不对 因为那个酶是平末端 不是很好用 一般不会想到甲基化吧 你在重切一次 或换其他公司的酶
3楼2008-11-17 22:26:05
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jfllfj

金虫 (小有名气)

换其他的酶切位点,或者把质粒送到甲基化酶缺陷的宿主中去扩增 然后再切
2楼2008-11-17 14:46:09
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playboy723

金虫 (正式写手)

我过夜切的  时间应该够了吧?
那哪种菌是甲基化酶缺陷的啊    我对这个还真不知道  望多多指教!!
4楼2008-11-17 23:04:28
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