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需要GlcNAc- P-Man
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需要[3H]GlcNAc- P-Man，中文名: N-乙酰葡糖胺-磷酸-甘露糖（氚同位素标记的）。哪个公司或者是实验机构有卖的或者有条件合成的后出售的。 文献上有合成的步骤如下：Synthesis of [3H]GlcNAc-P-ManaMe. The reaction buffer was prepared by sequential addition of 1 M Tris-HCl, pH 7.4 (250μl), fresh 25 mM dithiothreitol(50 μl),500 mM GlcNAc (500 μI), 100 mg/ml BSA (100μI), 500mM sodium molybdate (100μI), 3% (v/ v) Lubrol-PX(500 μl), 1 M MgCl (50 μl), and 1 M MnCl, (50μl) and 1M ManαMe (1400 μl) to a 15-ml Pyrex tube. UDP-Nacetyl-[3H]glucosamine was placed in a 1.5-ml polypropylenetube and the solvent removed under vacuum by centrifuge evaporation. The UDP-N-acetyl-[3H]glucosamine was resuspended in 250 μlof 100 mM ATP plus 75μl of 100 mM UDP-GlcNAc and GlcNAc-phosphotransferase added to the reaction buffer. The reaction was carried out for 36 h at roomtemperature. 中文合成步骤：依次加入1 M Tris-HCl, pH 7.4 (250μl)，25 mM新配置的的二硫苏糖醇，500 mM N-乙酰葡糖胺(500 μI)，100 mg/ml牛血清白蛋白 (100μI)，500mM钼酸钠 (100μI)，3% (v / v) Lubrol-PX(500 μl)，1 M氯化镁 (50 μl)，1 M氯化锰(50 μl)，1M α甲基甘露糖 (1400 μl)到15 ml管中做为反应缓冲液。尿苷二磷酸-N-乙酰-[3H]葡糖胺溶解在250 μl含100 mM ATP，75μl of 100 mM尿苷二磷酸- N-乙酰葡糖胺中。和适量的N-乙酰葡糖胺磷酸转移酶加入到反应缓冲液中，室温36小时反应。 谢谢！ |
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