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静默人声412

木虫 (小有名气)

[求助] 用格里斯试剂鉴定筛选土壤中氨氧化细菌,但没有显红色菌,这是怎么回事呢?

材料:土壤
第一次用的富集培养基(NH4)SO4         2.0g                                                      未经富集的土壤直接涂布产生各种菌,只有一种菌变红,可是之后提不出DNA
                           NaH2PO4                      0.25g                                               刚开始在未加格里斯试剂的培养基中,挑菌在白瓷板中再加格里斯试剂无颜色
                              K2HPO4             0.75g                                                        反应,不知道怎样鉴定,哪位大神有跟系统的方法,求助一下!
                                MnSO4•4H2O         0.01g                                                   第一次: 格里斯试剂:甲液;0.5g磺胺酸溶于150ml30%醋酸
                               MgSO4•7H2O         0.03                                                                 乙液:1-萘胺0.5g加入50ml蒸馏水煮沸后全部加入150ml10%醋酸
                            CaCO3                          5.0g                                                  第二次:甲液:4g苯磺酸+700ml水+300ml冰醋酸
                                 PH               7.2                                                                           乙液:0.2g1-萘胺+100ml60%醋酸
但是富集之后涂平板产生的菌没有显红色的,
第二次富集:(NH4)SO4          0.5g
            KH2PO4             0.2g
            GaCl2•2H2O         0.04g
            MgSO4•7H2O         0.04g
            柠檬酸铁          0.5mg
            NaCl               0.85g
           好氧氨氧化细菌显色剂:格里斯试剂5ml
            PH8.0
富集一个月后,涂平板上几乎不长菌,长菌也无颜色变化。
固体培养基:(NH4)SO4          0.5g
                 KH2PO4             0.2g
                    GaCl2•2H2O         0.04g
                 MgSO4•7H2O         0.04g
                 柠檬酸铁          0.5mg
               NaCl               0.85g
               好氧氨氧化细菌显色剂:格里斯试剂5ml
             琼脂粉          15%
                       PH8.0
富集培养基也用过:(NH4)SO4          0.5g
           KH2PO4             0.2g
           GaCl2•2H2O         0.04g
            MgSO4•7H2O         0.04g
            F-EDTA           0.5mg
            甲酚红            0.5mg
               PH                 8.0
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