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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

[交流] T7、BGH reverse的退火温度?

pcDNA 3.1上的两个测序引物:
T7

BGH reverse
拿来做菌落PCR的话,退火温度多少合适?
引物单上Tm(50mM Na+)一个是42.5,一个是45.2
按照我的经验是提高3到5度
不过也才48度,会不会太低了?
做过的进来交流下吧~~
我用的是promega的GoTaq预混buffer
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

……好吧,我今天用50度P出来了
下次挑战50.5……
3楼2008-11-16 14:27:42
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

惊讶,难道没人做过?
2楼2008-11-15 21:50:03
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