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C溯原

新虫 (小有名气)

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7楼: Originally posted by 云卷云舒六 at 2016-08-15 08:55:16
有可能是细胞种板时状态不好。还有就是培养条件一下子改变细胞不适应,可以缓慢改变细胞培养状态,待其适应后再种板。

如果是贴壁细胞,加药前需不需要等细胞贴壁?

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11楼2016-08-16 21:05:39
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danny925

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

第一张图片能看到细胞正常形态,状态不好,第二张看起来可能是污染了,后面的图片没看到正常细胞,应该都是死细胞了。养细胞是个精细活。注意接板之前的细胞状态必须是好的。
12楼2016-08-16 22:09:19
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zhu201114

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

细胞状态不好,马上就要污染了。尤其会跟培养箱的条件有关系。注意清洁一下
13楼2016-08-16 22:53:44
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RiqiangBao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

哈哈,和我上次一样,第一次接种结果全挂了就周边有几个坚强的活着,我感觉是有三个原因第一是吹打的太用力了,第二是接种96孔板时我每孔加4ul重悬细胞,我是等全加完了才加剩余的96ul培养基的,可能这个过程太久了导致碱性过高了吧,所以得及时的加上剩下的培养基,第三个就是第一次用的2%FBS 。第二次时这些问题都注意了,而且先用10%FBS,第二天再换你需要的,然后现在都长的很好~希望能帮到你

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14楼2016-08-16 23:25:17
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曲直炎上

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by RiqiangBao at 2016-08-16 23:25:17
哈哈,和我上次一样,第一次接种结果全挂了就周边有几个坚强的活着,我感觉是有三个原因第一是吹打的太用力了,第二是接种96孔板时我每孔加4ul重悬细胞,我是等全加完了才加剩余的96ul培养基的,可能这个过程太久了 ...

谢谢你,我下次注意吹打及加样时间的控制再试试

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15楼2016-08-17 11:28:03
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曲直炎上

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by zhu201114 at 2016-08-16 22:53:44
细胞状态不好,马上就要污染了。尤其会跟培养箱的条件有关系。注意清洁一下

好的,谢谢

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16楼2016-08-17 11:28:53
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曲直炎上

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by danny925 at 2016-08-16 22:09:19
第一张图片能看到细胞正常形态,状态不好,第二张看起来可能是污染了,后面的图片没看到正常细胞,应该都是死细胞了。养细胞是个精细活。注意接板之前的细胞状态必须是好的。

接种的时候感觉细胞挺好的,一块板上其他组别长的也挺好的,就是正常组总是这样,中间细胞死掉了

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17楼2016-08-17 11:32:56
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曲直炎上

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by C溯原 at 2016-08-16 21:05:39
如果是贴壁细胞,加药前需不需要等细胞贴壁?
...

我是种板后24h,给药

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18楼2016-08-17 11:35:05
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曲直炎上

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by wjf7862203 at 2016-08-15 10:24:53
没有说你具体培养的是什么细胞,用于做什么的,你的培养条件环境怎么样。只能从第二张开始细胞就慢慢不行了,到最后几张都是死掉了,对于这种情况,如果你时间充足,细胞充足可以采用排除法,1、首先排除污染,可以 ...

您好,我养的是HUVEC,做药物有效成分的筛选
这几张图都是正常组的孔里拍的,是由边缘往中间的状态,边上看着还正常,中间就死了。板上还有很多给药组还都挺正常的,没想明白

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19楼2016-08-17 11:44:15
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曲直炎上

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liuyao_jack at 2016-08-15 01:37:01
第一张的细胞还算正常。可能原因,1培养液污染,2培养液忘加FBS,3培养箱CO2没了或温度不对。

其实,123是一个孔,从边缘往中间

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20楼2016-08-17 11:54:57
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