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新虫 (初入文坛)

[交流] 氨苄和潮霉素抗性载体可以转入哪种农杆菌 已有4人参与

我构建重组载体的骨架是psilent-1,具有氨苄和潮霉素抗性,打算用农杆菌介导转入真菌。做药物敏感实验的时候,我发现AGL-1, GV3101都有氨苄抗性,没有办法 筛选。(但我还是做着试了下,用氨苄筛选就长一片,用潮霉素筛选就不长。)目前打算再用LBA4404做一下,试试看。
想请教下有经验的战友几个问题:1.氨苄抗性质粒通常选择转入哪一种农杆菌??
2.为什么将质粒转入农杆菌时都不用潮霉素筛选???(我查看了很多文章,没有看见质粒转入农杆菌就用潮霉素筛的,通常用在后面的共转化筛选中。)
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你得看质粒图谱,在农杆菌中和植物中所启用的抗性是不一样的,并不是所有抗性基因都启动。

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A right way maybe not a good way!
4楼2017-03-11 10:47:05
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花落已季末

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,我也在做农杆菌介导的真菌转化试验,农杆菌BA4404,一直没有成功,请问你那边试验如何,有没有什么经验传授一下?
流年似水,看不透的是红尘中镜花水月;往事如烟,挥不去的是岁月荏苒一过往;待得繁华落尽,只余回忆。
2楼2016-11-14 10:13:36
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蹇晨

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-11 10:06:47
潮霉素磷酸酶转移基因是插入植物的区段,使植物具有的抗性

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3楼2017-03-11 08:24:00
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一米阳光LOVEU

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
氨苄抗性是针对原核的,潮霉素抗性是针对真核的。顺便问一下,你最终转化到农杆菌中去是PSILENT1吗,没有改造吗

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5楼2017-09-06 17:13:08
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