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青春不朽新虫 (初入文坛)
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[求助]
稳定同位素核酸探针技术求助
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本人研一即将升研二，研究黑臭河道氮元素循环相关方向，导师现在让写实验方案，希望我用到稳定同位素核酸探针技术（DNA-SIP）。现阶段看了些文献，对于DNA-SIP技术存在以下几点疑问：1，标记底物培养细菌最佳底物该如何选择，如我要鉴定河道底泥中的异养反硝化细菌，反硝化脱硫菌，硫酸盐还原细菌，厌氧氨氧化细菌，硝酸盐异化还原成铵细菌，而这些细菌中有的是自养，有的是异养，有的是严格厌氧，有的是兼性厌氧，这种情况下是不是需要对不同的细菌用不同的含13C的物质标记？且针对不同的细菌是否标记底物的浓度、培养时间也需要预实验来确定最佳时间？ 2，实际操作中 如何鉴定13C-DNA的富集程度，超高速密度梯度离心之后不同浮力密度13C-DNA如何分离？3，DNA-SIP所结合的PCR或者高通量测序和我们平常所使用的一般DNA提取之后的PCR或高通量测序有没有什么不同？4，大家是否有熟悉的做这方面技术的公司，本人学校在上海，最好能介绍在上海的检测公司或者研究所。 希望有了解这方面技术的同学给我指点一二，感激不尽！ |
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