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wxmwqr

金虫 (小有名气)

[求助] 求助羰基还原酶的资料(有效期至2008年11月15日)

研究药物在体内的代谢过程,我怀疑药物主要是通过羰基还原酶做用,然后经过葡萄糖磷酸化代谢处体外的。所以想深入研究药物的羰基还原作用。第一次接触酶学,想求助关于羰基还原酶(carbonyl reductase)的分类、种类、抑制剂、药物探针等详细资料。

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wangysh520

 从近平滑假丝酵母(CandidaparapsilosisCCTCC203011)中分离得到了新的NADPH依赖型羰基还原酶。粗酶经硫铵分级沉淀、DEAESepharose离子交换层析、Phenyl-sepharoseFF疏水层析、BlueSepharoseFF亲和层析后在SDS-PAGE上显示为单一条带,其酶蛋白的相对分子质量为30kD。该酶还原反应的最适pH值为4.5,最适温度为35℃,Cu2+对羰基还原酶有强烈的抑制作用。该酶具有较高的底物专一性和立体选择性,对α-羟基苯乙酮和4-氯乙酰乙酸乙酯具有较高的不对称还原活力,其产物分别为(S)-苯基乙二醇和(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,e.e值分别为100%和94.3%。因此该酶蛋白是不对称合成手性醇有效的生物催化剂之一。经LC-MASS-MASS分析得到了酶蛋白中一个肽段的氨基酸序列,通过比对发现该酶与假定蛋白(hypotheticalproteinCaO19.10414)具有一定的同源性。
【作者单位】:江南大学教育部工业生物技术重点实验室 江苏无锡214036
【关键词】:生物催化;羰基还原酶;分离纯化;(S)-苯基乙二醇;(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯
【基金】:国家973计划(No.2003CB716008);国家自然科学基金(No.20376031);长江学者和创新团队发展计划(PCSIRT,IRT0532);新世纪优秀人才支持计划(NCET-04-0498)
2楼2008-11-15 00:46:17
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liufuchun721521

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3楼2008-11-15 08:44:15
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liufuchun721521

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4楼2008-11-15 14:13:52
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