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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 高效液相色谱同时分离精氨酸和天冬氨酸
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嘉嗳佟

新虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱同时分离精氨酸和天冬氨酸 已有6人参与

用反相高效液相色谱（紫外检测器）分离精氨酸和天冬氨酸，我测了它俩在紫外区是有吸收的，可试了好多条件都不出峰，流动相是水和甲醇，我想问问关于pH怎么调节啊？或者其他条件咋么改变？求帮助。

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1楼 2016-08-06 11:22:24
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
精氨酸和天冬氨酸看结构，紫外吸收应该很弱，而且极性很强，一般的C18可能是没有保留的，楼主用的什么检测波长？和用的什么色谱柱呢？
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

嘉嗳佟
2楼2016-08-06 17:18:03
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的这个条件没法检测

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2016-08-06 17:24:36
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump

【答案】应助回帖

建议你看看这篇文献
http://onlinelibrary.wiley.com/d ... .201190014/abstract
Liquid-Chromatography Quantitative Analysis of 20 Amino Acids after Derivatization with FMOC-Cl and Its Application to Different Origin Radix isatidis
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4楼2016-08-06 17:27:16
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jzpxs

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
氨基酸液相色谱都是要将氨基酸衍生的，衍生试剂是能买到的，还相对比较复杂。
如果用专用的氨基酸分析仪，就不需要衍生的。
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5楼2016-08-06 19:23:17
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嘉嗳佟

新虫 (初入文坛)
可是我做的是在不衍生的情况下分离呀不过还是谢谢你

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6楼2016-08-08 09:56:18
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嘉嗳佟

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-08-06 17:18:03
精氨酸和天冬氨酸看结构，紫外吸收应该很弱，而且极性很强，一般的C18可能是没有保留的，楼主用的什么检测波长？和用的什么色谱柱呢？

考虑到甲醇的末端吸收，我用的215nm的检测波长，柱子是Sepax HP-C18

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7楼2016-08-08 09:59:54
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嘉嗳佟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 嘉嗳佟 at 2016-08-08 09:59:54
考虑到甲醇的末端吸收，我用的215nm的检测波长，柱子是Sepax HP-C18
...

如果说是没有保留的话那应该是柱子的问题咯，那我下一步打算换用蒸发光检测器检测检测是不是也不得行呀？

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8楼2016-08-08 10:04:18
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 嘉嗳佟 at 2016-08-08 10:04:18
如果说是没有保留的话那应该是柱子的问题咯，那我下一步打算换用蒸发光检测器检测检测是不是也不得行呀？
...

你这个2个化合物用215nm，估计都检测不到，紫外吸收太弱了，用蒸发光是可以的，如果不用衍生化法，可能要考虑换色谱柱了
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9楼2016-08-08 12:44:16
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忍冬1018

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
使用热电的氨基柱可以分离，具体条件你可以问下厂家
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10楼2016-08-08 13:54:14
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