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打哈欠的人

金虫 (正式写手)

[求助] 胞内细胞因子染色有哪些需要注意的小细节!求前辈们分享!

各位虫友大家好!
最近在做ifn-g 的胞内因子染色,但是最后上流式的时候总是几乎没有阳性细胞,不知道哪里出了问题。
我的大致流程:取出淋巴结后,培养基中研磨提细胞,加入BFA,抗原和CD107a抗体,37度孵育5-6小时,随后洗去,加FcR block,4度15分钟,不洗去接着 孵育细胞表面抗体CD3/8,随后4%多聚甲醛固定5分钟,PBS/S 孵育30分钟破膜,染IFN-g 抗体,洗去上流式。
请大家赐经验,让我看看哪里出问题了,谢谢大家!
有值得一看的资料也希望大家不吝分享呀!

@gyesang 发自小木虫Android客户端
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打哈欠的人

金虫 (正式写手)

为什么没有人回复呀……因为金币不够吗
2楼2016-10-13 14:16:04
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