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打哈欠的人

金虫 (正式写手)

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[求助] 胞内细胞因子染色有哪些需要注意的小细节!求前辈们分享!

各位虫友大家好!
最近在做ifn-g 的胞内因子染色，但是最后上流式的时候总是几乎没有阳性细胞，不知道哪里出了问题。
我的大致流程：取出淋巴结后，培养基中研磨提细胞，加入BFA,抗原和CD107a抗体，37度孵育5-6小时，随后洗去，加FcR block,4度15分钟，不洗去接着孵育细胞表面抗体CD3/8，随后4％多聚甲醛固定5分钟，PBS/S 孵育30分钟破膜，染IFN-g 抗体，洗去上流式。
请大家赐经验，让我看看哪里出问题了，谢谢大家!
有值得一看的资料也希望大家不吝分享呀！

@gyesang 发自小木虫Android客户端

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