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hubuzdw

金虫 (正式写手)

“cas9在component cell里发生切割”,感觉更像是Cas9 切割了质粒,大肠杆菌里面,启动子没有那么严格,可能有渗漏。如果能体外证明你另外4个sgRNA能切割靶序列,这两个就不用纠结了。
清风吟月,秋水伊人
11楼2016-08-14 11:58:42
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现在很好

新虫 (初入文坛)

我也在做Cas9,我想请问一下你在设计sgRNA的时候用的是哪些软件?还有就是sgRNA的模板是正义链还是反义链?
12楼2016-10-10 17:17:03
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乌托小邦

木虫 (正式写手)

小虫虫

引用回帖:
12楼: Originally posted by 现在很好 at 2016-10-10 17:17:03
我也在做Cas9,我想请问一下你在设计sgRNA的时候用的是哪些软件?还有就是sgRNA的模板是正义链还是反义链?

就是mit的那个网站。。模板正反义链都可以的,因为最终会两条链都切断。
凡事心中有数,人生难得糊涂。
13楼2016-10-10 20:35:18
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乌托小邦

木虫 (正式写手)

小虫虫

引用回帖:
11楼: Originally posted by hubuzdw at 2016-08-14 11:58:42
“cas9在component cell里发生切割”,感觉更像是Cas9 切割了质粒,大肠杆菌里面,启动子没有那么严格,可能有渗漏。如果能体外证明你另外4个sgRNA能切割靶序列,这两个就不用纠结了。

恩 已经放弃那两个了。。
凡事心中有数,人生难得糊涂。
14楼2016-10-10 20:35:45
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darlingbear

新虫 (小有名气)

那你做转化时有没有做阳性和阴性对照,可能是长的单菌落有问题呢

发自小木虫Android客户端
15楼2016-10-11 19:17:36
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卷哥

金虫 (小有名气)

16楼2016-10-14 19:22:20
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