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hubei989

木虫 (正式写手)

酵父菌

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1507
帖子: 729
在线: 109小时
虫号: 596349
注册: 2008-09-09
性别: GG
专业: 细胞生物学

[求助] 5‘→3’ 核酸外切酶求助已有1人参与

有木哪位虫子用过或者知道 5‘→3’ 核酸外切酶？我想把部分配对的双链DNA的长链的5’端切掉，想用核酸外切酶切，只切5‘粘性末端（15nt）。然后，我的短链5’端有FAM标记，最好不要把标记切掉~
见图：

E%BHUJ24D`2GLD5SL{5J5N7.png

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迷惑不解~

1楼 2016-08-03 17:03:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

June201309

捐助贵宾 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 105.3
散金: 161
帖子: 83
在线: 29.9小时
虫号: 2696679
注册: 2013-10-03
专业: 发育生物学

【答案】应助回帖

RecJ f 核酸外切酶(RecJ f Exonulease)产品及特点:

RecJf 作用于单链 DNA,沿 5 →3 方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf 与麦芽糖结合蛋白 (MBP) 融合表达。其催化特性与野生型 RecJ 相同。与MBP的融合,增强了 RecJf 的溶解度。当底物为 5 端突出了 22 个核苷酸的 DNA 时,经RecJf 酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物:平齐末端、5 突出末端 (1-5 个核苷酸) 和 5 凹陷末端 (1-8 个核苷酸) 。RecJf 发挥活性时无需 5末端磷酸化。

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