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maosan520

铜虫 (初入文坛)

[交流] 关于pEASY-Blunt克隆载体

不知道哪位大侠用过pEASY-Blunt克隆载体,给说说经验呗,另外,今天我用它自带的control 做对照pcr没p出来,因为我做了改动,所以就不知道是哪的问题了体系,条件如下:
control template 1 ul
control primers 1 ul
5x prime star HS DNA polymerase buffer
2.5mM dNTP 5 ul
prime star HS DNA polymerase 0.5ul (takara公司)
ddH2O to 50 ul
分成两管,也就是25ul体系
条件:
95,5min
94,30sec
55,30sec
72,1min
72,10min
30cycle
好像是改的多了点,啥都没p出来,哪怕是杂带。请大侠指教啊
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菜鸟一只
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