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血雨沉竹

新虫 (小有名气)

[求助] 小鼠灌胃菌悬液后如何提取肠组织中的菌 已有2人参与

想做降胆固醇实验，通过给小鼠灌胃乳酸菌，之后想提取肠道中菌体提取DNA，看有文献中写：取出保存的小鼠肠道各部分组织，展开平整放置于盖玻片上，利用载玻片刮取肠黏膜上面黏附的菌体，获得菌体放入一干净的Ep管中。
是这样操作吗？那是把肠组织剪开然后刮肠组织的内壁吗？会看到刮下什么吗？
还是有什么其他的方法？
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1楼 2016-08-02 19:41:38
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baoshanqiu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
"利用载玻片刮取肠黏膜上面黏附的菌体"这种说法实际上是不专业的，也不可能看到菌体。只能是刮取粘液和食物残渣、粪便混合物，其中可能含有菌体。
如果要看乳酸菌能否通过胃液存活，可直接从粪便/肠内容物选择性培养乳酸菌。如果要看乳酸菌在肠道定植的情况，可以做多次培养。
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2楼2016-08-02 22:27:51
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血雨沉竹

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by baoshanqiu at 2016-08-02 22:27:51
"利用载玻片刮取肠黏膜上面黏附的菌体"这种说法实际上是不专业的，也不可能看到菌体。只能是刮取粘液和食物残渣、粪便混合物，其中可能含有菌体。
如果要看乳酸菌能否通过胃液存活，可直接从粪便/肠内容 ...

从粪便或肠内容物选择性培养乳酸菌是通过选择性培养基进行筛选吗？

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3楼2016-08-02 22:46:06
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baoshanqiu

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 血雨沉竹 at 2016-08-02 22:46:06
从粪便或肠内容物选择性培养乳酸菌是通过选择性培养基进行筛选吗？
...

是呀，要不然肠道那么多细菌，怎么区分？当然如果你的乳酸菌有特异性的遗传标志，也可直接PCR.
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4楼2016-08-03 01:31:49
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微基生物

捐助贵宾 (小有名气)

技术专员

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还是不太明白你的实验目的。
你是想检测处理后小鼠肠道中的微生物多样性吗？如果这样的话可以取小鼠粪便或者小鼠肠道内容物进行微生物多样性检测就可以了。小鼠肠道分为十二指肠、空肠、回肠、结肠，看你的实验目的是研究哪一部分，研究哪一部分就取哪一部分肠道的内容物，之后对样品进行16S测序。
你如果是对肠道中乳酸菌进行检测，取样还是按照上述取，但是需要用乳酸菌的特异性引物进行扩增。
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专注微生物多样性分析QQ2758452825
5楼2016-08-03 13:42:05
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