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意孤城_金虫 (正式写手)
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[求助]
小鼠单细胞悬液制备 已有1人参与
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有没有做过肝脏，脾脏，肺这些小鼠组织到单个细胞悬液制备的？求protocol 怎样能从组织将他们裂解成单个的细胞悬液进行培养？ |
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意孤城_
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2楼2016-08-02 15:26:49
黄亚杰2013
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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不知道楼主只是取脏器还是会再观察小鼠术后。目测肝肺都有，估计只是取组织了。 本人跟着别人学过一些取脾细胞的，颈椎脱臼法处死小鼠，浸泡75酒精2-5min，取脾脏，在200目的铜网筛研磨，收取滤过的细胞，离心，洗涤，离心，计数，接种培养。 需要注意的是脾脏的取法：脾脏在右侧卧位，提起皮毛，眼科剪剪开一个口，然后手撕到一个清晰的视野；换个剪子切开腹膜，看到脾脏，用镊子游离出来；然后把脾脏上的一层包膜给除掉，用镊子，动作要轻。研磨的时候也要注意不要用尖锐的器具以免伤害到细胞。最好准备灭好两套手术用的东西。多练几只耗子就可以做了。 上述取得细胞肯定好多种，然后根据你想要的纯化就可以啦。 |
3楼2016-08-03 10:25:08
xiangyunch
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5楼2016-10-31 16:54:17
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6楼2016-10-31 16:56:15