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[交流]
毛细管电泳的使用请教
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我面试去怕老师问我毛细管电泳操作经常会出现哪些问题,但我没有使用过, 请教高手们给与指点,测定药物时怎么使用,过程中经常会出现什么样的问题 请多给出一些指点 |
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4楼2008-11-13 14:16:10
jsys
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博洋Lab
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本使用注意事项仅适用于BECKMAN COULTER P/ACE™ MDQ 型号毛细管电泳仪,其他P/ACE 系列毛细管电泳仪用户请斟酌使用。建议使用BECKMAN COULTERP/ACE™ MDQ 前请务必仔细阅读本使用注意事项、32 Karat 软件使用手册及安装维护指南,以确保仪器的安全稳定运行。 1. 毛细管及卡盒部件 1.1. 向卡盒内装毛细管时,要把远离窗口的毛细管一端穿入卡盒 1.2. 切割毛细管时不可用刀片把毛细管压断,也不可以来回划割毛细管 1.3. 拆换毛细管时,要从近窗口的一端把毛细管拉出 1.4. 毛细管的长度调节通过调节冷却软管长度来实现,更换新冷却软管的时候一定要注意两端的O形垫圈不要漏垫,深蓝色的塑料压头是有方向的,如图所示,浅蓝色的螺帽不可旋得过紧 1.5. 检测窗口的安装应该是在将毛细管两端卡好并切割完毕以后;PDA 检测器只可使用标识为8的窗口,UV 检测器8 和2 的标识窗口都可以使用。 1.6. UV 及DAD 检测窗口由卡盒的背面向正面插入,且不可插错方向。检测窗口安装之前一定要确保其内没有保留有未取出的黑色O 形垫圈 1.7. UV 及DAD 检测窗口安装后一定要将O 形垫圈装入 P/ACE™ MDQ 使用注意事项 2. 样品瓶及托盘 2.1. 三种标准配置的缓冲溶液及样品瓶各有其相对应颜色的瓶盖,不可混用 2.2. 2mL 缓冲溶液瓶的液面高度不得低于1/2,也不可超过瓶颈,标准的液面高度如下图示: 2.3. 2mL 缓冲溶液瓶瓶口和瓶颈内部不得沾有液体,如果有液体存在,要将瓶口和瓶颈内壁的液体擦干再盖瓶盖。此部位的液体残留可能会导致毛细管及电极的折断 当发现缓冲溶液瓶盖上有液体时一定要立即擦干或更换 2.4. 缓冲溶液瓶盖及样品瓶盖均不可用洗涤剂长时间浸泡或放入烘箱烘干,会导致瓶盖的老化 2.5. 用于装废液的样品瓶要及时清理,不可过满,过高的废液量既会污染毛细管,也会造成气路的阻塞 2.6. 仪器运行期间不得打开Sample Cover,只有托盘在Load 状态才可以打开Sample Cover 和Cartridge Cover 3. 涂层毛细管及试剂盒的使用 3.1 涂层毛细管不得使用氢氧化钠溶液冲洗 3.2 涂层毛细管不可用火焰烧制窗口 3.3 涂层毛细管使用结束后应用纯水冲洗干净,然后从仪器上拆下,连带卡盒放入卡盒盒中,两端浸泡在事先装满水的2ml 缓冲溶液瓶中。最后整个盒子放入4℃冰箱保存 3.4 在使用任何试剂盒之前必须仔细阅读试剂盒的使用手册,不清楚的地方要与工程师联系以免操作失误造成损失 3.5 在使用试剂盒进行用户方样品分析之前,请用试剂盒中的标准试剂测试毛细管等部件,确保能得到与参考谱图类似的结果 4. 冷却液系统及电极 4.1. 冷却液只需要罐装到3/4 的高度 4.2. 补充冷却液时要注意:先将注射器活塞拔除,在将注射器也软管相连,再将软件联至注入口,冷却液由注射器出倒入,提起注射器后冷却液会自动流入,残留的液体可用活塞压入 4.3. 电极应定期清洁(per month),先采用湿水绵擦拭,再用酒精面擦拭以确保其导电性 4.4. 在仪器使用完毕后,要先将留在卡盒中的冷却液回流才能关闭主机 4.5. 当灯箱部分和卡盒冷却液管出现黑色脏迹后可用酒精棉擦拭清除,注意:Interface Block 下面处于两电极之间的部分也要用酒精棉擦拭,以去除灰尘,防止漏电Current Leakage 5. 检测器部件 5.1. 各检测器的连接光纤在不使用时,必须用塑料帽扣紧 5.2. 拆换检测器之前必须先关闭仪器主机电源 5.3. 光纤接头的拆装是顺序的,对于UV/DAD 检测器,安装光纤接头的顺序是由下至上,拆卸光纤接头的顺序是由上至下 5.4. 当发现毛细管检测窗口有断裂并有液体流出污染检测孔径及光纤接头时,应立即用清水冲洗孔径和光纤接头,并立即用洗耳球吹干,不得用有机溶剂冲洗光纤接头 P/ACE™ MDQ 使用注意事项 6. 软件操作及积分 6.1. 仪器运行过程中的数据处理应在offline 窗口中进行,否则有可能导致运行程序的中断 6.2. 处理使用DAD 检测器得到的数据时,必须调整波长下拉窗口与处理波长相一致,否则会导致积分参数表与波长不对应。例如,要积分280nm 数据,则必须先选择以下的下拉菜单至280nm 6.3. 输出ASCII 数据时也要先选择波长下拉菜单至所需要的波长,这样得到的数据表中第一组数据即为该波长吸收数据。ASCII 数据的输出方法为Method|Advanced|Export 然后进行如下设置。并调整输出路径到你想要的文件夹,点击Analyze 得到ASCII 文件 7. 关闭主机及保养 7.1 长时间不使用的试剂不得存放于仪器托盘中,特别是盐酸,有可能造成仪器部件的腐蚀,和仪器内的湿度增加 7.2 未涂层的毛细管长时间不用,要先用水清洗,再用空气吹干 7.3 长时间不使用仪器,在停机之前必须使样品及缓冲溶液托盘处于Load 状态 7.4 仪器要注意防尘和防潮 |
2楼2008-11-13 13:31:12












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