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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用trizol提取血清中的RNA，trizol和血清的用量比例多少适宜
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cheng201618

新虫 (初入文坛)

[求助] 用trizol提取血清中的RNA，trizol和血清的用量比例多少适宜 已有2人参与

用trizol提取血清中的RNA，trizol和血清的用量比例多少适宜

@biostar2009 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2016-07-26 21:48:12
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丑小喵

新虫 (初入文坛)
没用过血清，用过血液，250ul血液，750ultrizol,

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2楼2016-07-27 18:55:22
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吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般都是1ml的trizol,50-100ul的样本提取就可以了吧，我是使用biodai提取血清RNA，50ul洗脱液洗涤下来，小提量的浓度也就15ng/ul。
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3楼2018-12-19 16:23:03
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主血清要新鲜的，如果是冻存的需要完全解冻之后再加Trizol，通常Trizol和血清的比例是1:1，也可以稍多加一些Trizol，少加些血。混匀之后放置10分钟左右，直接加三氯甲烷混匀再去离心，可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷。我们实验室用BIOG CFRNA EASY KIT离心技术提取RNA,楼主需要注意每个步骤操作要快，用的时间药短些，防止RNA降解,异丙醇沉淀的时候，放-20°C的冰箱半个小时，或再适当延长一点时间。迅速离心，之后加75%乙醇。只洗一遍，洗2遍易损失部分RNA。不要过分干燥，管内稍有点残余的乙醇也没关系。干燥一会就迅速加DEPC水少量。提取RNA之后迅速反转录成cDNA再保存。
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4楼2018-12-27 17:04:16
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