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新虫 (正式写手)

[交流] ellman试剂测巯基含量

用Cys作标准曲线。加样顺序:buffer+样品+DTNB,加完样,涡旋混匀,室温反应5分钟后用酶标仪测吸光值。Cys和样品(抗体偶联巯基)一起处理。对于Cys标准品而言,放置时间越长吸光值越小,特别是高浓度的Cys其吸光值升高得越明显,对于样品而言放置时间越长吸光值越大。
问题1. 样品反应时间太短了,没有充分反应?
问题2. 标准品Cys和样品分开处理,先处理Cys直到其吸光值不变;再处理样品,直到其吸光值不变?是否可以提高准确度。
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