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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 用液相色谱分离四种植物激素，峰形分分离度不够，请问应该怎么调整？
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haohanhou

新虫 (初入文坛)

[求助] 用液相色谱分离四种植物激素，峰形分分离度不够，请问应该怎么调整？ 已有2人参与

用液相色谱分离四种植物激素，峰形分分离度不够，老师说应该调整流动相梯度，请问应该怎么调整？原理是什么？原则是什么？
附件里有我的色谱图形和流动相梯度，谢谢。用液相色谱分离四种植物激素，峰形分分离度不够，请问应该怎么调整？
IMG_4745_副本.jpg
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    • 2016-07-25 17:27:07, 66.5 K

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1楼 2016-07-25 17:27:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
haohanhou: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2016-07-26 21:05:39
进样体积为啥进30微升？都快满量程了 色谱柱是啥？ 流动相升的太快了 甲醇初始比例降到10% 维持一分钟 再在12分钟内增加到60% 到12.5分钟上升到100% 维持3min 到15.5回到10% 维持4min
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2楼2016-07-26 09:41:57
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普通回帖

haohanhou

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2016-07-26 09:41:57
进样体积为啥进30微升？都快满量程了 色谱柱是啥？ 流动相升的太快了 甲醇初始比例降到10% 维持一分钟 再在12分钟内增加到60% 到12.5分钟上升到100% 维持3min 到15.5回到10% 维持4min

用的是Waters X-BridgeTm C18色谱柱
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3楼2016-07-26 21:48:30
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by haohanhou at 2016-07-26 21:48:30
用的是Waters X-BridgeTm C18色谱柱...

多少微米的？5微米？先试试再说

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4楼2016-07-26 22:11:36
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haohanhou

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lifucheng at 2016-07-26 22:11:36
多少微米的？5微米？先试试再说
...

是5um的
用液相色谱分离四种植物激素，峰形分分离度不够，请问应该怎么调整？-1



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5楼2016-07-27 12:40:55
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mao877516786

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
haohanhou: 金币+1, ★有帮助 2016-07-28 19:01:16
从谱图上看，6分钟内峰几乎全部流出，而从你的分析条件看常规250的柱子，1ml/min的流速，一个柱体积4min左右可以说你的样品几乎没有保留，说明甲醇起始浓度过高，梯度过快，建议你30min内从5%的甲醇跑到75%的甲醇看一下分离效果。另外你问的这三个问题，建议你参看一些液相的入门书籍。
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6楼2016-07-28 15:37:57
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haohanhou

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mao877516786 at 2016-07-28 15:37:57
从谱图上看，6分钟内峰几乎全部流出，而从你的分析条件看常规250的柱子，1ml/min的流速，一个柱体积4min左右可以说你的样品几乎没有保留，说明甲醇起始浓度过高，梯度过快，建议你30min内从5%的甲醇跑到75%的甲醇看 ...

thanks，有没有哪些入门书籍推荐呢？
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7楼2016-07-28 19:01:51
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mao877516786

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by haohanhou at 2016-07-28 19:01:51
thanks，有没有哪些入门书籍推荐呢？...

写个地址，发你
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8楼2016-07-29 15:38:34
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haohanhou

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by mao877516786 at 2016-07-29 15:38:34
写个地址，发你...

haohanhou@yeah.net
thanks

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9楼2016-07-29 17:09:02
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dongyang5028

金虫 (正式写手)
分不开，降低速度，减少有机相比例

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10楼2016-07-29 17:28:23
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