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xiaozzjin

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[求助] 关于用三乙胺改善峰型

目前在用HPLC分析地塞米松，柱子是安捷伦的poroshell 120 EC C18，流动相用的是乙腈和水，但峰型不好，总有拖尾，如下图
$\"关于用三乙胺改善峰型\"$

后来在水相中加入了10mM的三乙胺，流动相用50/50（乙腈/水），峰型有所改善，重复性也很好，如下图
$\"关于用三乙胺改善峰型-1\"$

当时以为这么点三乙胺，应该pH不会太高，后来测了一下混合后的流动相pH在10.3左右，柱子的pH使用范围为2~9，但是用这个流动相已经在柱子上测了4天左右，不过每次测完都会用乙腈和水冲洗过夜。接触HPLC不久，现在担心柱子会不会因为用了高pH的流动相已经坏了？如何判断柱子是否损坏？现在看柱压和之前比也没什么变化。

之后用乙酸调节了水相的pH，尝试了pH 4，7和8，也尝试了不同的乙腈和水相比例，还有不同波长，但峰型都不好，如下图：
$\"关于用三乙胺改善峰型-2\"$

按说pH会影响三乙胺的效果，但是峰型为什么这样呢？会不会因为柱子已经损坏？我可以如何改进呢？

谢谢大家！@鸭绿江畔@superyeast@wyy080214@klicking@学术巨星

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1楼 2016-07-25 07:36:22

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