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luweidong401

金虫 (著名写手)

[求助] 多组分亚基,同时还是重叠基因,如何做蛋白表达

目前在做代谢降解,发现其中一步催化反应由一个多组分酶完成的,基因分析发现这几个组分是由重叠基因编码的,如果在大肠杆菌中做蛋白的表达,该如何做呢?

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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


我觉得可以把基因分别克隆出来,然后各自装到大肠表达质粒,然后转化同一个大肠宿主细胞,共表达

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2楼2016-07-25 15:57:28
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luweidong401

金虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2016-07-25 15:57:28
我觉得可以把基因分别克隆出来,然后各自装到大肠表达质粒,然后转化同一个大肠宿主细胞,共表达

嗯嗯。另外,把整个重叠基因的ORF(包括第一个组分的起始密码子开始,到最后一个组分的终止密码子的序列)整个插入到表达载体中,大肠杆菌能不能识别?毕竟大肠杆菌基因组里面也有重叠基因。

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3楼2016-07-26 07:43:47
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luweidong401

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by luweidong401 at 2016-07-26 07:43:47
嗯嗯。另外,把整个重叠基因的ORF(包括第一个组分的起始密码子开始,到最后一个组分的终止密码子的序列)整个插入到表达载体中,大肠杆菌能不能识别?毕竟大肠杆菌基因组里面也有重叠基因。
...

不知道我这个想法靠不靠谱?

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4楼2016-07-26 07:45:45
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