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wb显影后总是出现黑色边框，且背景很黑，急啊。求解，感谢 已有2人参与
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新手，最近在做WB。出现了以下问题： 1、做了4-5次，总是出现黑色边框，如下图 2、背景出现黑色部分，感觉脏的样子。 3、做actin，有的样品出现条带，有的没有。 实验条件： 转膜条件：300mA， 50min or 1h 封闭1.5h, 用的5%脱脂奶粉+TBST 一抗，CST β-Actin, 1:5000，室温摇1h, 4°过夜 次日，室温摇0.5h，TBST洗3次，10min/次， 孵二抗，santa 1:5000 or 1:10,000，室温摇1h。 TBST，3*10min，TBS ，3*10min 暗室显影。 问了一些同学，，试过调整抗体浓度，稀释更高的倍数。始终不得其解。 有经验的大侠帮帮忙，解惑，不胜感激啊！！  wb.jpg |
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2楼2016-07-23 16:15:34
柳梢月
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3楼2016-07-24 21:04:11
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一抗4°过夜后第二天干嘛还要室温要0.5小时呢，没必要。其次，稀释一抗和二抗的时候都可以在抗体里加封闭液，用TBST洗的时间可以延长到10min5次 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-07-24 21:15:33
5楼2016-09-05 08:40:36
wuhu0612331
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7楼2016-09-05 09:41:27
wuhu0612331
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