应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩增
162/2返回列表上一页12
查看: 1629  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

不爱做实验

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
LY1199: 金币+3 2016-07-29 10:42:24
引物二聚体这么亮。说明引物特异性不好。适当提高退火温度。
或者可以加大模版量，增加几个循环，这样目的片段的量会得到更多一些，方便后续实验
赞一下 回复此楼
11楼2016-07-25 18:28:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿尔卑斯英

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Marker度量不准确，更换maker吧，引物添加量过多，引物最适加入量0.1uM-0.5uM。
赞一下 回复此楼
12楼2016-07-26 16:06:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LY1199

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 阿尔卑斯英 at 2016-07-26 16:06:08
Marker度量不准确，更换maker吧，引物添加量过多，引物最适加入量0.1uM-0.5uM。

好的  我再试试 多谢了
赞一下 回复此楼
13楼2016-07-27 10:31:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LY1199

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 不爱做实验 at 2016-07-25 18:28:01
引物二聚体这么亮。说明引物特异性不好。适当提高退火温度。
或者可以加大模版量，增加几个循环，这样目的片段的量会得到更多一些，方便后续实验

嗯  引物因为是在文献找的  没有自己搞
应该会有些问题  但是现在已经更换不了……55555
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2016-07-27 10:32:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不爱做实验

银虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by LY1199 at 2016-07-27 10:32:52
嗯  引物因为是在文献找的  没有自己搞
应该会有些问题  但是现在已经更换不了……55555...

更换不了？你可以看看目前引物是不是自身发卡结构太明显。
如果是，可以尝试把引物去掉几个碱基，再查看发卡结构。
赞一下 回复此楼
15楼2016-07-28 14:29:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wbhnan

新虫 (初入文坛)
marker 换一个，胶的浓度是多少，还有胶有点不均匀。
退火温度调整一下，做个梯度实验摸索一下，因为你的事短片段所以延伸时间缩短一下，主要看你的2*Taq Mix的说明，再不行把6ul DD Water换成2ul DD Water+4ul  5*甜菜碱试试
赞一下 回复此楼
16楼2016-08-12 17:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LY1199 的主题更新
162/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:58 by C79jjtjAKjEn
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:49 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 05:34 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:13 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:01 by mibUvS8DDCwf
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:45 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭