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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 利用胶回收试剂盒过滤柱增加DNA浓度
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pangadmire

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by stone2239 at 2016-07-22 00:52:18
已经说得很清楚了，比如你有50uL样品要浓缩，加入100uL预冷无水乙醇，混匀，置于-20三小时，12000rpm离心10min，弃去上清，吸除残留液体，畅盖挥发干燥后，加20uL水溶解，这样浓度就了，操作注意点，一般损失会很少 ...

是不是加入-20预冷无水乙醇后，放置-20三个小时，离心后，把管中液体全部吸除，开盖挥发干净够，加水溶解即可？谢谢

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11楼2016-07-22 01:05:04
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by pangadmire at 2016-07-22 01:05:04
是不是加入-20预冷无水乙醇后，放置-20三个小时，离心后，把管中液体全部吸除，开盖挥发干净够，加水溶解即可？谢谢
...

是
12楼2016-07-22 01:22:55
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pangadmire

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by stone2239 at 2016-07-22 01:22:55
是...

第一次做，见谅见谅，我的理解是，离心后去掉全部液体，挥发完乙醇后，此时DNA成干粉状附着于管壁，加水溶解即可。没错吧？十分感谢！第二个问题，没有冻干机直接开盖放在超净台自然挥发几个小时可以吗？谢谢！

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13楼2016-07-22 02:23:22
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css910320

银虫 (正式写手)
可以，我这么做过

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14楼2016-07-22 06:28:17
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by pangadmire at 2016-07-22 02:23:22
第一次做，见谅见谅，我的理解是，离心后去掉全部液体，挥发完乙醇后，此时DNA成干粉状附着于管壁，加水溶解即可。没错吧？十分感谢！第二个问题，没有冻干机直接开盖放在超净台自然挥发几个小时可以吗？谢谢！
...

实在没冻干机 可以这样做

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15楼2016-07-22 09:17:52
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lxzk

木虫 (正式写手)
现在的小朋友连乙醇沉淀都不知道就开始做实验，本科不是生物学专业的吗？别人提了还不知道自己去查一下，分子克隆随便哪个版本都可以，或者任何一本靠谱的分子生物学实验教材，再或者百度一下都可以。
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16楼2016-07-23 00:05:56
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lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
另外上面提供的方法忘了加盐，DNA比较短或者浓度低的话最好再加一点糖原，重悬之前最好用70%乙醇洗一次，具体细节请自行查阅相关书籍或者百度。
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17楼2016-07-23 00:10:29
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houfuyuan

新虫 (小有名气)
你样品多 ，那你就可以这样做，我做过，是能增加浓度。当然损失的也多了。
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玉无瑕，青春无华。
18楼2016-07-23 19:56:57
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pangadmire

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by lxzk at 2016-07-23 00:05:56
现在的小朋友连乙醇沉淀都不知道就开始做实验，本科不是生物学专业的吗？别人提了还不知道自己去查一下，分子克隆随便哪个版本都可以，或者任何一本靠谱的分子生物学实验教材，再或者百度一下都可以。

玩机械的拿个第二学位而已

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19楼2016-07-24 00:35:13
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jackyoung

新虫 (正式写手)
溶胶液加多了问题不大，在这种状态下DNA不是水溶溶解状态，可以反复过一个柱子，最后漂洗、洗脱。
沉淀的话也可以，就要看手法了，一般会有溶胶液成分的干扰。
谁试谁知道……

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CestLaVie
20楼2016-07-24 12:48:37
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