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wjf7862203

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 朱庆平 at 2016-07-16 10:49:01
不太了解,不过20μL的反应体系分散到那么多的微孔里,是要干什么?这么多细小的反应体系是用来检测什么的?其实就是,数字PCR用来作甚的?

分成更多的微反应就是来进行绝对定量 所以数字PCR对上样量有一定的要求,如果目标拷贝数太高,那所有的微反应都是阳性,就没有定量的意义,所以一般是对痕量的目标基因进行检测,如果目标基因很高,需要进行稀释后上样。荧光PCR检测结果是35个循环往后的,可以直接用数字PCR进行绝对定量

发自小木虫Android客户端
11楼2016-07-18 05:50:27
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原子伴侣

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
raindance bio-rad都属于油包水型,形成一定数量、稳定的油包水微滴是关键。
12楼2018-01-08 14:19:57
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小小风的爱

铁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
渊博震天: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-07-28 16:45:46
引用回帖:
3楼: Originally posted by 朱庆平 at 2016-07-16 10:49:01
不太了解,不过20μL的反应体系分散到那么多的微孔里,是要干什么?这么多细小的反应体系是用来检测什么的?其实就是,数字PCR用来作甚的?

是这样的,伯乐的仪器,采用油包水,将20微升的体系分成20000个液滴,但是反应的话还是将这20微升吸到一个管子里,进行PCR扩增(这里面的油滴可以耐受高温,就是一个小的PCR体系),扩增完成后,在进行荧光测定,荧光测定对每一个油滴都会检测,最后来绝对定量。
13楼2018-07-27 17:04:59
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风随心动

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
您好,可以向您请教个问题吗?请问您知道数字PCR做出来的微滴荧光比较离散是什么原因吗?
偶见繁星梦九天,只愿沧海桑田始如先。
14楼2019-10-30 10:47:39
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