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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱走叶绿素，前5分钟一定会有一段乱七八糟的峰，是什么？
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阿维victor

银虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱走叶绿素，前5分钟一定会有一段乱七八糟的峰，是什么？ 已有2人参与

基线噪声吗？还是鬼峰？？怎么都不像啊。还有我是色谱新手，不知道要提供什么信息才能让诸位分析原因，请大家留言，我知道的都会告诉大家！！谢谢！！！

柱子是c18柱
机器是安捷伦1260，


高效液相色谱走叶绿素，前5分钟一定会有一段乱七八糟的峰，是什么？
液相图谱-奇怪的峰.png@wyy080214@superyeast@学术巨星
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1楼 2016-07-14 20:17:30
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
HPLC的方法，流速，波长，柱子型号尺寸，分别是什么？
3分钟以前的峰，像是溶剂峰。4.5分钟的那一陀，像是杂质。
可以进一针溶剂，看是什么样子。如果纯溶剂走出来的峰，和上图的峰一样，说明就是溶剂峰。
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2楼2016-07-14 20:39:00
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shi102241218

木虫 (著名写手)
这一堆是若保留的东西，可以通过前处理柱除掉，如果你希望的组分在后面，可以不予考虑
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3楼2016-07-15 08:27:31
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shi102241218

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 阿维victor at 2016-07-15 09:06:55
这个是不需要的。。可以直接忽略吗？是什么原因造成有这个奇怪的峰呢，样品是标准品，应该只有单峰啊，这乱七八糟的一堆怎么出现的？
...

进样重复过没有？你所希望的组分在哪？，要是堆在这一堆里面肯定不行的
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6楼2016-07-15 10:21:22
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cpuclz

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 阿维victor at 2016-07-15 09:05:19
感谢您的指导！
您所需要的信息是这样的。
流动相及配比为：二氯甲烷:乙腈:甲醇:无菌水=20:10:65:5
样品的溶剂是用流动相配比制得的溶剂。
样品是配置好的标准液，里面若没有特殊情况的话应该只有一种物质。。
流速 ...

前面一坨应该是溶剂峰，忽略就行。
话说，我第一次见到，用DCM作流动相的……
个人建议，把DCM换成THF之类的。
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8楼2016-07-15 20:14:56
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huaruishi

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
前面的峰很小，可能是溶剂峰。完全可以忽略。关键看看后面样品出来后咋样。走一针溶剂看看。
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9楼2016-07-16 14:00:19
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zulovexin

木虫 (正式写手)
反相柱，二氯甲烷很伤柱子，会造成柱流失！找不到合适波长可以用分光光度计做个全扫描，找出最大吸收波长，然后再用色谱找合适波长！

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10楼2016-07-18 06:47:49
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普通回帖

阿维victor

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cpuclz at 2016-07-14 20:39:00
HPLC的方法，流速，波长，柱子型号尺寸，分别是什么？
3分钟以前的峰，像是溶剂峰。4.5分钟的那一陀，像是杂质。
可以进一针溶剂，看是什么样子。如果纯溶剂走出来的峰，和上图的峰一样，说明就是溶剂峰。

感谢您的指导！
您所需要的信息是这样的。
流动相及配比为：二氯甲烷:乙腈:甲醇:无菌水=20:10:65:5
样品的溶剂是用流动相配比制得的溶剂。
样品是配置好的标准液，里面若没有特殊情况的话应该只有一种物质。。
流速是1mL/min
柱型号是RP18 5μm 4.6×250nm column,
波长是这样，我们目前正在尝试多种波长，因为样品走不出来，大概5-6个波长，444nm，459nm469nm，在这些波长下都有一些类似的峰。

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4楼2016-07-15 09:05:19
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阿维victor

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shi102241218 at 2016-07-15 08:27:31
这一堆是若保留的东西，可以通过前处理柱除掉，如果你希望的组分在后面，可以不予考虑

这个是不需要的。。可以直接忽略吗？是什么原因造成有这个奇怪的峰呢，样品是标准品，应该只有单峰啊，这乱七八糟的一堆怎么出现的？

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5楼2016-07-15 09:06:55
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阿维victor

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shi102241218 at 2016-07-15 10:21:22
进样重复过没有？你所希望的组分在哪？，要是堆在这一堆里面肯定不行的...

组分不在里面。但是前面有这么一堆奇怪的峰真的好难过。。。是什么原因，能去掉么？

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7楼2016-07-15 11:49:59
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