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aaa13882528铁虫 (小有名气)
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[交流]
纯化蛋白时蛋白沉淀在resoure Q阴离子层析柱上 已有1人参与
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有个问题想请教虫友们,最近我在纯化一个核酸结合蛋白,超声破碎后离心沉淀就比较多,上清比较黄,然后经过镍柱纯化,洗脱buffer含500mM NaCl,100mM咪唑,然后超滤浓缩后将盐溶度稀释到50mM以下,挂resoure Q阴离子层析柱,蛋白沉淀在柱子上,上样的时候就很困然,用50mM-1mM的盐梯度洗脱基本没有峰,不知道有没有什么改进的好方法 |
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