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aaa13882528

铁虫 (小有名气)

[交流] 纯化蛋白时蛋白沉淀在resoure Q阴离子层析柱上 已有1人参与

有个问题想请教虫友们,最近我在纯化一个核酸结合蛋白,超声破碎后离心沉淀就比较多,上清比较黄,然后经过镍柱纯化,洗脱buffer含500mM NaCl,100mM咪唑,然后超滤浓缩后将盐溶度稀释到50mM以下,挂resoure Q阴离子层析柱,蛋白沉淀在柱子上,上样的时候就很困然,用50mM-1mM的盐梯度洗脱基本没有峰,不知道有没有什么改进的好方法
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hc-material

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
核算结合蛋白,建议你试试肝素亲和的介质。然后缓冲液里面加10%的甘油。沉淀,可以尝试加一些蛋白助溶剂,比如尿素,精氨酸,组氨酸等
2楼2016-07-19 15:49:02
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