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请教BMDM消化传代的问题
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近期来我们课题组在做小鼠骨髓巨噬细胞BMDM的原代提取，现主要卡在了BMDM消化传代的问题上 我提取Bab／c小鼠骨髓单核细胞后，在含L929上清的培养基刺激分化6天（大皿）。消化的时候每皿加3ml含0.25%edta的胰酶37度温箱内作用5-12min（5、8、12min都试过），但细胞还是贴得很紧，吹打后还是很多没脱落下来。最后一个大皿只能收集到30-50万细胞传代，效率非常低。 故此，想请教下站友们：BMDM消化传代这个问题有解决的方法吗？或者我消化的时间仍然不够？胰酶不行？ 还请多多指教，万分感谢！🙏 ps：胰酶为gibico的含酚红的0.25% edta的胰酶 |
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