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weiwokaoyan

银虫 (著名写手)

[求助] 微藻多糖提取时TCA脱蛋白 已有2人参与

本人在做螺旋藻粗多糖的提取,乙醇沉多糖以后,是沉淀在底部还是形成絮状漂浮物?TCA脱蛋白以后多糖颜色变得更深了怎么回事?
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
weiwokaoyan: 金币+2, 有帮助 2016-07-16 13:17:48
乙醇沉淀多糖应该是沉淀在底部,有的也会是浑浊液,需要离心取沉淀。TCA沉淀蛋白一般会使溶液的颜色加深,但后续还需要将多糖沉淀出来,所以不会影响多糖的颜色。颜色加深可能是因为TCA与某些蛋白反应产生了有色的物质。
苦难的日子终将逝去,但强者却永存
2楼2016-07-12 16:39:00
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weiwokaoyan

银虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by w911227 at 2016-07-12 16:39:00
乙醇沉淀多糖应该是沉淀在底部,有的也会是浑浊液,需要离心取沉淀。TCA沉淀蛋白一般会使溶液的颜色加深,但后续还需要将多糖沉淀出来,所以不会影响多糖的颜色。颜色加深可能是因为TCA与某些蛋白反应产生了有色的物 ...

谢谢了。您做过有关微藻多糖的提取吗?我用TCA沉淀了两次蛋白,然后4倍体积沉的多糖,颜色还是有点深,干燥后多糖成块状,并不是粉末啊,怎么回事??
3楼2016-07-12 17:29:23
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by weiwokaoyan at 2016-07-12 17:29:23
谢谢了。您做过有关微藻多糖的提取吗?我用TCA沉淀了两次蛋白,然后4倍体积沉的多糖,颜色还是有点深,干燥后多糖成块状,并不是粉末啊,怎么回事??...

我是提取的是动物多糖,和你的流程基本一样,沉淀后的蛋白加少量水溶解然后真空冷冻干燥,得到的是絮状的多糖,但是我后面有加活性炭脱色。干燥后多糖的形态跟干燥方式干燥和样品的种类条件有关,你直接检测一下多糖的纯度,纯度够了就行了吧。
苦难的日子终将逝去,但强者却永存
4楼2016-07-12 19:43:29
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖


weiwokaoyan: 金币+1, 有帮助 2016-07-22 18:54:42
醇沉的时候尽量久点,多做几次,得率会高。
多糖形状和干燥方式差别很大,建议冷冻干燥。
5楼2016-07-19 11:00:21
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