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[交流] 快疯了，求指教

做转基因时，克隆的目的基因与数据库中的序列比对相似度达到多少以上可认为可以用于实验，我做了两个月实验了，序列相似度在98%以上，老师说pcr时退火温度偏低（49℃），未用高保真酶，所以建议重做。。。。额。。相似度98%以上难道不行吗，氨基酸序列只有一个密码子不一样啊。。求指教

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1楼 2016-07-03 13:37:17

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willzhuu

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克隆基因建议要用高保真酶，不是说要和ncbi的一样，而是要以你自己的测序结果为准。高保真酶是必须的。

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不求一鸣惊人，但求抛砖引玉。

2楼2016-07-03 23:42:29

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出去吃饭吧

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一个位点就可以导致翻译出的蛋白没功能

我爱旅行

3楼2016-07-04 15:43:21

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引用回帖:

2楼: Originally posted by willzhuu at 2016-07-03 23:42:29
克隆基因建议要用高保真酶，不是说要和ncbi的一样，而是要以你自己的测序结果为准。高保真酶是必须的。

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4楼2016-07-05 09:48:51

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 出去吃饭吧 at 2016-07-04 15:43:21
一个位点就可以导致翻译出的蛋白没功能

感谢回复

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5楼2016-07-05 09:49:04

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