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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 求助如何确认抗体上标记的偶联物
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chenruixi

金虫 (小有名气)

[求助] 求助如何确认抗体上标记的偶联物 已有1人参与

各位虫友大家好，如题，最近在做将一荧光染料（染料用NHS活化）偶联到抗体上的实验，我要如何确认自己是将染料连接到了抗体上呢？
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1楼 2016-06-30 18:08:58
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zijun800630

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chenruixi: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-07-01 15:20:18
用紫外分光光度计就可以的：
未偶联的抗体与偶联后透析纯化的抗体紫外吸收峰不一样，荧光染料本身在紫外下有吸收峰。
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2楼2016-07-01 13:47:20
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chenruixi

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zijun800630 at 2016-07-01 13:47:20
用紫外分光光度计就可以的：
未偶联的抗体与偶联后透析纯化的抗体紫外吸收峰不一样，荧光染料本身在紫外下有吸收峰。

谢谢！请问透析纯化具体如何操作呢？
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3楼2016-07-01 15:19:56
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zijun800630

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenruixi at 2016-07-01 15:19:56
谢谢！请问透析纯化具体如何操作呢？...

标记后将混合物放入透析袋中，在透析缓冲液中4度用磁力搅拌子搅拌过夜，换液几次，这样大部分未标记上的小分子即可被透析除去。
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4楼2016-07-04 08:55:11
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