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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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chenruixi

金虫 (小有名气)

[求助] 求助如何确认抗体上标记的偶联物 已有1人参与

各位虫友大家好,如题,最近在做将一荧光染料(染料用NHS活化)偶联到抗体上的实验,我要如何确认自己是将染料连接到了抗体上呢?
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zijun800630

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chenruixi: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-07-01 15:20:18
用紫外分光光度计就可以的:
未偶联的抗体与偶联后透析纯化的抗体紫外吸收峰不一样,荧光染料本身在紫外下有吸收峰。
2楼2016-07-01 13:47:20
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chenruixi

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zijun800630 at 2016-07-01 13:47:20
用紫外分光光度计就可以的:
未偶联的抗体与偶联后透析纯化的抗体紫外吸收峰不一样,荧光染料本身在紫外下有吸收峰。

谢谢!请问透析纯化具体如何操作呢?
3楼2016-07-01 15:19:56
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zijun800630

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenruixi at 2016-07-01 15:19:56
谢谢!请问透析纯化具体如何操作呢?...

标记后将混合物放入透析袋中,在透析缓冲液中4度用磁力搅拌子搅拌过夜,换液几次,这样大部分未标记上的小分子即可被透析除去。
4楼2016-07-04 08:55:11
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