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humants

金虫 (正式写手)

[交流] 高保真酶哪家好?

高保真酶哪家好?
最近在实验中遇到了些困难,麻烦大家给你帮忙。

我打算做PCR扩增目的基因,的目的基因大小为970bp,gc%含量正常,克隆出来的基因将来适用于蛋白的表达来测定活性,所以要求没有突变,因此打算用高保的酶,但是搜了很多家,到说自己的是super保真的,搞不懂到底保真性如何?

大家有没有用过的,哪家的保真性好啊?(价格也别太离谱..呵呵呵)

希望望大家,能说一下自己的体会.   小弟不才,先谢谢了.
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bluesky3858

银虫 (小有名气)

★ ★
humants(金币+2,VIP+0):请问,你用的生工的高保真酶是生工自产的还是他代理MBI,BBI的?测序结果怎么样?目的基因有多大?问得挺多的,麻烦你解答 谢谢...
我们用的上海生工的pfu酶,还可以吧
默默的努力!永远的开心!
2楼2008-11-08 10:50:25
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢 5-10 17:54
PfuUltra 2
用过的人都说基本忽略测序~~~
3楼2008-11-08 11:32:35
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欣晴5832

金虫 (小有名气)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢,你的帮助。
我们用的是南京博尔迪的2*ULtra-pfu Master Mix,效果不错,它里面加的高保真酶很好,也单卖,可以先让他们送一点试用装试一下
4楼2008-11-08 22:17:16
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speculiar

银虫 (小有名气)

takara 的primerstar
5楼2008-11-08 23:16:32
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
humants(金币+2,VIP+0):谢谢 5-10 17:54
保真性最最强的就是Pfu Ultra 2。。。现在目前所有的高保真酶都不用跟它比
价钱忘记
其实一般来说,用Invitrogen的白金高保真Taq(不是Pfx),控制好循环数就好了,而且这个酶的扩增性能很好,基本可以保证1min/kb的速度,同时对于痕量模板的扩增性能也挺突出(我做BSP很清楚……通常经过bisulfite处理的模板都剩下那么一丁点)
价钱大概是1个单位6元
同档次的是KOD的
takara的其实上不了档次,扩增能力也一般……虽然便宜
6楼2008-11-08 23:25:26
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yuanshuish

Phusion™ High-Fidelity DNA Polymerase

New England Biolabs, Inc.

感觉保真性很好,而且速度很快,以质粒为模板15sec 1kb
7楼2008-11-09 06:33:06
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humants

金虫 (正式写手)

天根的怎么样??????????
8楼2008-11-11 10:58:57
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

国产酶自动忽略无视……
9楼2008-11-11 13:52:31
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61930979

金虫 (小有名气)

TaKaRa 的好
10楼2008-11-11 14:38:43
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