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daidong2014

新虫 (正式写手)

[求助] 自制marker靠谱吗? 已有1人参与

老板说买胰岛素(分子量5807)和谷胱甘肽做Marker(分子量307)。因为主要检测分子量为2000Da左右的多肽。所以大家觉得这个可靠吗?胰岛素和谷胱甘肽我又该怎么处理呢?

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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

可以分开,不同分子量的蛋白marker对应的SDS-PAGE胶的浓度不同,你查查看什么浓度的胶合适。2000的建议你在加一个抗菌肽标品,抗菌肽标品2400。祝顺利

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2016-06-28 09:02:34
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普通回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以啊,只要是买的标准品蛋白就可以,然后用电泳buf配下就完事。前提是买的标准品,还不如买marker便宜省事。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2016-06-28 08:43:08
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daidong2014

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2016-06-28 08:43:08
可以啊,只要是买的标准品蛋白就可以,然后用电泳buf配下就完事。前提是买的标准品,还不如买marker便宜省事。

感谢大神。请问分子量这么小的Marker(5800Da和307Da的)跑出来能区分的开吗?因为看商品化的Marker都是几十到几百KDa的。电泳小白求指教。

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3楼2016-06-28 08:53:01
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daidong2014

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2016-06-28 09:02:34
可以分开,不同分子量的蛋白marker对应的SDS-PAGE胶的浓度不同,你查查看什么浓度的胶合适。2000的建议你在加一个抗菌肽标品,抗菌肽标品2400。祝顺利

非常感谢

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5楼2016-06-28 09:52:59
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daidong2014

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2016-06-28 09:02:34
可以分开,不同分子量的蛋白marker对应的SDS-PAGE胶的浓度不同,你查查看什么浓度的胶合适。2000的建议你在加一个抗菌肽标品,抗菌肽标品2400。祝顺利

大神。刚才查了资料得知,10KDa以下的小分子肽,即使使用较高浓度的聚丙烯酰胺也不能完全分离,或者是显不出色,或者是显带较弱,带型弥散。求指教。

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6楼2016-06-29 00:09:11
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berniehuang

铁杆木虫 (正式写手)

自制的是可以,但如果不标记的话,跑电泳时看不到marker的

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7楼2016-06-29 09:20:05
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