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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取时RNA保护液产生的干扰。
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kshdd

金虫 (著名写手)

[交流] RNA提取时RNA保护液产生的干扰。 已有2人参与

水样经0.22滤膜过滤，放入RNA保护液中进行保存，RNA提取采用mobil试剂盒，但是在提取过程中发现残留在滤膜上的RNA保护液会对RNA提取有干扰，请问又遇到相同情况的大神没有。谢谢。
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1楼 2016-06-27 11:21:14
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werq63

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那就不用保护液了，用depc水

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2楼2016-06-28 21:34:07
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爱睡猪

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
RNA保护液里面貌似含有大量的盐离子，稍微挥发点水就会结晶，我不采用试剂盒提取，直接手提的方法，送公司高通量测序符合要求，你可以试试
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ControlMyself
3楼2016-06-29 08:55:03
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kshdd

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱睡猪 at 2016-06-29 08:55:03
RNA保护液里面貌似含有大量的盐离子，稍微挥发点水就会结晶，我不采用试剂盒提取，直接手提的方法，送公司高通量测序符合要求，你可以试试

提取过程中有注意到高盐溶液对RNA提取质量的影响，但是没有好的解决办法。我是人工用手把rna保护液甩干，2次实验提取的质量还可以。不知道您有什么好的办法，去除rna保护液的干扰?

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4楼2016-06-29 10:18:47
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爱睡猪

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by kshdd at 2016-06-29 10:18:47
提取过程中有注意到高盐溶液对RNA提取质量的影响，但是没有好的解决办法。我是人工用手把rna保护液甩干，2次实验提取的质量还可以。不知道您有什么好的办法，去除rna保护液的干扰?
...

我咨询技术人员他们建议直接用吸水纸吸干都是可以的，或者离心去除保护液，我的实验不允许这样的操作，我的样品太小，基本跟匀浆后的样品颗粒一般大小，我都是在提取的过程中进行两次抽提，清洗两次，损失稍微大一点，但是质量还可以。
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ControlMyself
5楼2016-06-29 10:55:25
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kshdd

金虫 (著名写手)
吸水纸吸干对盐的去除怎么样？因为我觉得主要是高盐对提取的rna有影响

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6楼2016-06-29 13:55:28
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kshdd

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 爱睡猪 at 2016-06-29 10:55:25
我咨询技术人员他们建议直接用吸水纸吸干都是可以的，或者离心去除保护液，我的实验不允许这样的操作，我的样品太小，基本跟匀浆后的样品颗粒一般大小，我都是在提取的过程中进行两次抽提，清洗两次，损失稍微大一 ...

吸水纸吸干对盐的去除怎么样？因为我觉得主要是高盐对提取的rna有影响

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7楼2016-06-29 13:55:49
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