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依怡伊益

银虫 (初入文坛)

[求助] wb显不出来条带,好伤心 已有1人参与

显色出来,整个膜糊成一大片,仔细看目的条带(上面是目的条带,下面是内参)应该出现的位置,也没有发现目的条带和内参显出来,我是wb新手,诚惶诚恐请教大家,这是怎么回事,

wb显不出来条带,好伤心


wb显不出来条带,好伤心-1


@gyesang 发自小木虫Android客户端
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看样子,一般是二抗没有洗干净。另外,封闭不彻底、一抗浓度高、二抗浓度高等等,也会有这种现象。所以你要规范化操作,WB灵敏度很高,ng级别的。既然是新手,就再做几次,很正常。

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2楼2016-06-23 20:28:57
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star013

新虫 (知名作家)


3楼2016-06-24 08:07:04
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star013

新虫 (知名作家)


4楼2016-06-24 08:37:52
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林子来了

新虫 (初入文坛)

检查一下你的操作咯,这个一片黑还真没见过,怀疑你是否洗过

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5楼2016-06-25 23:46:01
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依怡伊益

银虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-06-23 20:28:57
看样子,一般是二抗没有洗干净。另外,封闭不彻底、一抗浓度高、二抗浓度高等等,也会有这种现象。所以你要规范化操作,WB灵敏度很高,ng级别的。既然是新手,就再做几次,很正常。

谢谢指导,我最近有在修改条件,重新做。

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6楼2016-07-09 08:03:05
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依怡伊益

银虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 林子来了 at 2016-06-25 23:46:01
检查一下你的操作咯,这个一片黑还真没见过,怀疑你是否洗过

洗是洗了,难道洗得不够,我是TBST洗三次,每次十分钟

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7楼2016-07-09 08:04:30
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

8楼2016-07-14 20:09:41
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柳梢月

金虫 (小有名气)

在孵育一抗和二抗的时候在抗体里加封闭液,在洗一抗和二抗的时候用TBST多洗几次,时间久一点,1个小时都不要紧

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9楼2016-07-24 21:27:34
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wochong

新虫 (小有名气)


WB实验操作及常见问题分析,你可以看看 http://www.detaibio.com/material-western-blot.html
10楼2016-07-25 17:57:26
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