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liiyu

木虫 (小有名气)

[求助] 多肽纯化

含半胱氨酸的多肽用制备柱纯化时,在流动相中需要加入什么还原剂么?只加0.1%TFA可以防止被氧化么?谢谢!
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DECHIBIO

金虫 (著名写手)


后处理的时候注意避光,冻干的时候注意避光,

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2楼2016-06-22 21:42:38
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liiyu

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by DECHIBIO at 2016-06-22 21:42:38
后处理的时候注意避光,冻干的时候注意避光,

还要避光啊。。那请问还原剂要加的么?

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3楼2016-06-23 07:04:00
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wd63725561

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

一两个CYS问题不大,在酸性条件下氧化缓慢,过完柱子第一时间冷冻干燥

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2016-07-26 15:28:45
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liiyu

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by wd63725561 at 2016-07-26 15:28:45
一两个CYS问题不大,在酸性条件下氧化缓慢,过完柱子第一时间冷冻干燥

有五个呢?已经抽换氩气,放冰箱保存了,一段时间后,跑液相就在旁边还是多出来一个小峰

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5楼2016-07-26 15:47:15
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zhy33385

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

读过一篇文章,说cys的保护基在酸性条件下容易脱掉,但去保护的侧链在酸性条件下不稳定,不知该如何理解这句话

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6楼2016-07-26 16:38:52
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zhy33385

木虫 (正式写手)

另外,在合成过程中cys还有消旋的问题

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2016-07-26 16:41:41
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liiyu

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhy33385 at 2016-07-26 16:41:41
另外,在合成过程中cys还有消旋的问题

谢谢,那怎么避免消旋呢?

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8楼2016-07-26 22:23:42
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liiyu

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhy33385 at 2016-07-26 16:38:52
读过一篇文章,说cys的保护基在酸性条件下容易脱掉,但去保护的侧链在酸性条件下不稳定,不知该如何理解这句话

谢谢,但露出来的巯基应该在酸性条件下比较稳定才是啊

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9楼2016-07-26 22:24:55
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屎太浓

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

露出来的巯基在酸性条件下还算稳定,有5个半胱氨酸建议楼主每个步骤都小心氧化,低温密闭保存,纯化过程中或后期可以加入少量DTT,应该就没有问题了。

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10楼2016-10-18 16:41:06
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