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匿名

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1楼2016-06-21 15:03:33
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家

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你平衡液里面先不要加盐，如果有非特异性吸附，要为了避免非特异性吸附，可以适量加点10~20mM的盐。平衡液里盐浓度大蛋白吸附不上去，就相当于洗脱了。因为洗脱液与平衡液的区别就在于平衡液加了2M的盐。Q的使用推荐缓冲也如下：平衡液（淋洗液）0.05M Tris ,PH8.3;洗脱液0.05M Tris+2M Nacl PH8.3。注意样品预处理后，上样前充分平衡，平衡液（淋洗液）和洗脱液PH和电导要一致。

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4楼2016-06-22 14:25:44
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
再点一根烟: 金币+5 2016-06-22 16:45:36
上样液及平衡液的离子强度太高。离子交换上样缓冲液离子强度要很低。先脱盐，在过离子交换。或者先过离子交换的，在过GST。祝顺利。
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2楼2016-06-22 10:41:20
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匿名

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3楼2016-06-22 14:16:40
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
再点一根烟: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-06-22 16:44:26
Q是强阴离子交换介质，适宜目标蛋白是带负电荷的蛋白，注意一定把缓冲液配置正确，PH值和浓度啊什么的。还有蛋白所以的适宜操作温度，这些都注意下。

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5楼2016-06-22 14:29:28
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