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15729217609

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by sayen at 2016-06-20 10:07:03
你没说质粒理论大小是多少

这是六个不同的重组质粒,分子量在6600-6700bp之间,右边MARK最上边那条带是5000bp

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笑一笑没什么事过不了!
11楼2016-06-20 10:51:12
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孤鸿飘渺影

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 15729217609 at 2016-06-20 09:45:43
但是,第二条分子量比这个重组质粒DNA理论上分子量要大?这样正确吗?
...

不正确。如果你图中第二条带是线性化,那么它代表的就是理论大小。但提质粒时线性化条带不会这么亮。
12楼2016-06-20 13:40:56
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孤鸿飘渺影

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 孤鸿飘渺影 at 2016-06-20 13:40:56
不正确。如果你图中第二条带是线性化,那么它代表的就是理论大小。但提质粒时线性化条带不会这么亮。...

很可能你第二条带就是超螺旋,第一条带是开环,第三条带不清楚。
13楼2016-06-20 13:43:54
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cxwu10016869

金虫 (著名写手)

应该没问题,第二条亮的条带是超螺旋的质粒

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14楼2016-06-20 21:13:43
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

质粒提取的一点问题都没有,很漂亮,好几条带很正常,好多人解释的也很正确,不要再纠结质粒的大小了,几种形式会同时出现,酶切以后一目了然,这时候再看大小才能知道对不对,然后再测序鉴定

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15楼2016-06-20 22:54:16
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15729217609

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-06-17 19:25:09
如果是没有酶切的质粒,这样的现象也正常吧,这三条带应该都是你的质粒,只不过处于不同的形态,在电泳检测的时候就会出现不同的迁移,当你进行酶切后质粒处于同一状态,就不会这样了,祝好!
...

这个问题弄明白了,是试剂盒原因,我换了一个试剂盒提取同一菌液中的质粒,就是很正常的了。超螺旋质粒条带最亮,上面两条线性和开环质粒条带就很浅!谢谢大家的分析!

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笑一笑没什么事过不了!
16楼2016-06-25 22:38:21
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