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lanlan1119

金虫 (小有名气)

[交流] 大家好,求教关于流动相的问题

请问,每次换流动相时,要用流动相平衡柱子多长时间。我用甲醇:0.01%的磷酸配比,每次走柱子前平衡大约一小时,但是加入的水的比例加大,发现柱头的压力升的好高啊,纯甲醇一样流速走压力就是0。而且每次加水平衡柱半小时左右就发现有一个大的吸收继续平衡基线会慢慢变平,这是正常现象吗?
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bullace

木虫 (职业作家)

早点睡觉觉

你关机前不冲柱子的?

加入的水的比例加大,发现柱头的压力升的好高------------是因为水的粘度大么

每次加水平衡柱半小时左右就发现有一个大的吸收继续平衡基线会慢慢变平----------估计是前面做样的东西被冲出来了,基线平了就可以做了么。。。因为我以前也有用磷酸调节流动相ph值的,关机前都要用纯水或者甲醇:水=10:90的流动相冲半小时后,再用甲醇冲后再关机的。
一宿东风满园春 千与千寻你何在 零星点点花中存 一点晶莹化朝露 夜看珍珠照月明
7楼2008-11-06 13:40:46
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jixf_1114

金虫 (正式写手)

压力为0肯定有问题.仔细说说方法及压力
2楼2008-11-05 20:38:14
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lanlan1119

金虫 (小有名气)

有点晕了!
压力为0怎么有问题呢,我用的是3.9x15mm的柱子,流速0.1~0.6压力都显示的是0,1.0的时候会有120~140的压力,柱子能承受的最大压力是4000.流动相用甲醇:0.01%磷酸水=50:50,流速0.6一开始显示的压力是0,走柱子半小时后压力就升到500左右了,走柱子一小时后就稳定在650左右。要是流速升到1压力能达到1300多。
用甲醇:磷酸水0.6ml/min走基线的时候发现其间有峰出现,走长时间基线平衡柱子峰能慢慢降下来基线回复平稳,但这个过程中伴随着压力的升高(由0升至650),有没有可能是水中有强保留的物质太多导致柱子有点堵造成压力升高的。
因为在用甲醇:磷酸水=50:50、70:30、80:20.等度走半小时样,用甲醇洗柱时都会有吸光度很大的吸收峰的峰出现,随着这些峰慢慢被洗脱出后,压力就慢慢降下来了。
3楼2008-11-05 21:58:22
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youarebeloved

金虫 (著名写手)

你压力的单位是bar吗,还是检测器的单位mV,甲醇和水的比例不同压力会有一定的变化,柱子最大能承受400bar的压力,0.6的流速甲醇大概会达到近100bar的压力,水的压力会小一些.
4楼2008-11-06 10:10:53
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