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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 高分子 » 高分子化学 » GPC 凝胶色谱柱的选择 急~
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qinxiangyi

新虫 (正式写手)

[求助] GPC 凝胶色谱柱的选择 急~ 已有3人参与

我们在外面检测机构做的图和仪器条件。选用的色谱柱是KF802.5，KF804，KF805串联的。它们的排除极限分别为300~8000, 7000~3*104, 5000~2*106.
这个结果比较好，能让样品的2个峰分离。详细图见附件

但是我们自己在实验室检测，用的色谱柱是HR4，HR5E串联检测的，它们的排除极限分别为5000~6*105, 2000~4*106.  我们检测的结果是只有一个宽峰，低分子量的峰分离度不好。

我们老师想再买一根柱子，替换HR5E使我们能检测出的结果与外面的结果类似，就是2个峰能分开。
现在有HR2 ,HR3，柱子，分别是500~20000， 5000~30000.    我应该选择哪一个？为什么？老师让我写份详细报告给她。谢谢啦

GPC 凝胶色谱柱的选择 急~
条件.png


GPC 凝胶色谱柱的选择 急~-1
图.png
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1楼 2016-06-13 15:19:09
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lzkong

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qinxiangyi(无视军团代发): 金币+1, 欢迎来高分子交流 2016-06-17 16:40:07
HR5E不要换，加一根HR2，这样和外面柱子范围就差不多了。至于报告就算了吧，这东西跟有机过柱差不多，柱子越长分的越开，你两根柱子怎么跟人三根柱子比。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2016-06-13 20:50:10
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qinxiangyi

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lzkong at 2016-06-13 20:50:10
HR5E不要换，加一根HR2，这样和外面柱子范围就差不多了。至于报告就算了吧，这东西跟有机过柱差不多，柱子越长分的越开，你两根柱子怎么跟人三根柱子比。
...

谢谢。如果是从检测范围来考虑选柱子的话，那一根HR5E的范围也足够了啊。
能否从其他方面考虑提高分离度呢？比如柱子分子量范围越接近待测物质，越准确？
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5楼2016-06-14 08:46:16
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
qinxiangyi: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-07-04 09:02:09
无意中发现一个问题，lz是不是认为不同型号的柱子对应分离不同分子量的样品？如果是的话，这不对哈，GPC分离是依赖于分子尺寸，你如果想得到同样的分离效果又不想更换同一厂家的色谱柱，可以对比两种色谱柱的说明书，比较填料类型、粒径、理论塔板数和最大孔径。找填料各方面都接近的得到相似结果的可能性比较大。
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19楼2016-07-01 17:43:32
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
22楼: Originally posted by qinxiangyi at 2016-07-04 18:03:39
谢谢！我对比了一下HR系列色谱柱和KF系列色谱柱参数，似乎只有量程有区别，而且我们的HR系列的颗粒尺寸更小些，理论上柱效应该更好呀。
  区别大概就是外面检测机构是三根色谱柱，多了个KF802.5的色谱柱。但是从谱 ...

如果是这样的话我觉得你加一根柱子效果会比较好，不要替换，就像虫友说的，可能主要问题就是你是两根人家是三根

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23楼2016-07-04 18:31:20
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分开又有什么意义，得完全分离开才好啊
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2楼2016-06-13 19:54:41
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qingzfla

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可用光散射仪检测分子量
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学海无涯，做专业的人做专业的事
4楼2016-06-14 08:38:55
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qinxiangyi

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by qingzfla at 2016-06-14 08:38:55
可用光散射仪检测分子量

我现在的问题是，老师要求我选一根柱子，并写报告说明选择原因。。。
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6楼2016-06-14 08:47:37
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by qinxiangyi at 2016-06-14 08:46:16
谢谢。如果是从检测范围来考虑选柱子的话，那一根HR5E的范围也足够了啊。
能否从其他方面考虑提高分离度呢？比如柱子分子量范围越接近待测物质，越准确？...

lzkong说得对，色谱柱越多，理论塔板数越多，分离效果越好。色谱柱的分离不能只看检测范围，在检测范围内只能保证样品不排阻也不渗阈，不一定能分出好结果
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7楼2016-06-14 11:26:15
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qinxiangyi

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-06-14 11:26:15
lzkong说得对，色谱柱越多，理论塔板数越多，分离效果越好。色谱柱的分离不能只看检测范围，在检测范围内只能保证样品不排阻也不渗阈，不一定能分出好结果...

谢谢！
问题是我们老师让我判断选择哪根柱子能让样品分离度达到和外面测试结果一样。
我又不能跟她说要多加柱子。
那把HR5E，HR4连同HR2/3串联效果会好吗？
我们的样品从外面检测结果来看，既有几十万的大分子，又有3万以下的小分子。如果要把它们分开，应该怎么串联组合HR系列的柱子呢？
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8楼2016-06-14 11:42:40
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qinxiangyi

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by qinxiangyi at 2016-06-14 11:42:40
谢谢！
问题是我们老师让我判断选择哪根柱子能让样品分离度达到和外面测试结果一样。
我又不能跟她说要多加柱子。
那把HR5E，HR4连同HR2/3串联效果会好吗？
我们的样品从外面检测结果来看，既有几十万的大分子 ...

再麻烦问一下，从题目中的色谱图中能看出关于物质的分子量情况吗？
因为其他工程师说从图中可以看出样品含有分子量3万以下的物质。
结果我们老师说不对。让我再看看图。我只能看出，一个在10万左右，一个在100万左右。其他什么都不懂
哪位大神能告诉我啊！不胜感激！！
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9楼2016-06-14 14:22:23
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by qinxiangyi at 2016-06-14 11:42:40
谢谢！
问题是我们老师让我判断选择哪根柱子能让样品分离度达到和外面测试结果一样。
我又不能跟她说要多加柱子。
那把HR5E，HR4连同HR2/3串联效果会好吗？
我们的样品从外面检测结果来看，既有几十万的大分子 ...

负责任的说法，只能试试看，不同型号的色谱柱，想要通过理论论证说明结果如何是不现实的。

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10楼2016-06-14 14:34:55
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