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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 请问抑菌实验中的病原菌浓度如何确定
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

[求助] 请问抑菌实验中的病原菌浓度如何确定 已有1人参与

我最近将表达的蛋白产物（抗菌肽类、溶菌酶等）和溶菌酶成品、氨苄青霉素等做抑菌实验

最后的实验结果除了氨苄有不错的抑菌圈之外其他几乎都看不到抑菌圈
只有溶菌酶的成品对两种芽孢杆菌有很小的抑菌圈

这时才想到用量的问题

我的氨苄青霉素浓度是50mg/mL
溶菌酶成品是10mg/mL

这浓度应该很高了吧，我看别人做的抑菌实验中用量都是0.1mg/mL的溶菌酶····

我病原菌一般都是取100uL接到900uL LB培养基里培养10h就拿出来用了，两层琼脂，上面一层加200uL，之后用牛津杯做
是不是受浓度影响太大了？


1.想问一下做这种抑菌实验所要求的病原菌浓度如何确定呢？是0.5的麦氏浊度吗？


2.查了一下粗略算的话。0.5麦氏浊度也就是1.5*10^8 CFU/mL,OD625大约在0.8~1.3即可
其他人做的文献里没有完全按照0.5麦氏浊度来的，有一个同样做溶菌酶的文章里用的浓度是1.5*10^9
他的细菌浓度是如何测定的呢？涂板培养的话黄花菜都凉了吧
试了一下用血球计数板测不了
有没有好用的测定细菌浓度的办法呢？
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1楼 2016-06-13 11:01:38
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kangyu91

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也试过血球板计数确实不行。抑菌试验的话，个人觉得没有必要知道精准的菌体浓度，只要是在数量级上相同就可以的哦。所以麦氏比浊是个还不错的方法。
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2楼2016-10-12 14:34:09
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多吉桑

新虫 (小有名气)
你好  想问下做微生物培养用的磷酸缓冲溶液是哪种的啊？pH7.4   摩尔浓度该是多大？
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3楼2016-10-12 15:49:58
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曦望云汉

新虫 (初入文坛)
请问楼主最后用抑菌圈判定溶菌酶抑菌效果，其培养基是用的什么呀

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4楼2021-07-07 16:05:40
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