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zhongliruoqi新虫 (小有名气)
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关于PSD-95免疫荧光染色的问题分析！ 已有1人参与
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各位大侠，本人最近有在做小鼠脑片冰冻切片后的海马PSD-95的IF，但染出来的片子看起来跟文献中的图(文献中一般都是confocal的图）挺不一样的。由于实验室对此方面没有涉及，在此希望可以得到大家的一些经验指导以及建议，多谢了！ 目前在做的仍算是预实验，染色的条件大致为：冰冻切片10um，封闭液5%NGS+1%BSA(含0.3%TritonX-100, 是借鉴了其他实验室的经验)，一抗1:500（Abcam的推荐浓度1:1000），二抗1：3000（推荐浓度1:1000-1:5000），是用正置荧光显微镜拍的。 染出来的片子存在的问题总体来讲：荧光比较暗，显色的绿点密度感觉不够高，显色的位置不能确定是不是染出了PSD-95(在40倍下可见很多荧光亮点是在神经元胞内，一般应该是树突（棘）上比较多)。希望大家可以提供些经验以及意见，再次感谢！  F4-.png  F20 1.png  F40 1.png |
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