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Gaos

木虫 (正式写手)

[交流] 用甲醇除蛋白怎么操作

我最近要用HPLC检测脑脊液中的谷氨酸和GABA。有文献报道,用高氯酸除蛋白会使谷氨酰胺转化为谷氨酸,从而引起脑脊液中谷氨酸的人为升高。所以我想用甲醇除蛋白,但不知道具体怎么做,而且需要加2倍体积的甲醇,这样的话不是把样品稀释了吗?会不会影响检测?请有经验的朋友指教。谢谢!
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读博士是为了什么?
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龙行天下8388

新虫 (正式写手)


佳怡(金币+1,VIP+0):感谢应助:)
一般用三倍量体积的甲醇进行蛋白沉淀,
假如你觉得浓度会受影响的华,
可以将上清液浓缩富集。
2楼2008-11-05 10:54:27
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Gaos

木虫 (正式写手)

有爱的日子(金币+0,VIP+0):已有虫友解答您的问题,请及时回复:)
那富集怎么做呢?是不是要蒸干?
读博士是为了什么?
3楼2008-11-05 11:46:34
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uliya809

木虫 (正式写手)


佳怡(金币+1,VIP+0):感谢应助~
如果浓度减少一点对检测没影响的话,直接进样就行了,但是HPLC检测一般的程序都要把样品用氮气吹干,然后用溶剂定容,最后再进样检测,这样浓度就不变了。
4楼2008-11-05 12:25:47
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opq691

荣誉版主 (知名作家)

小木虫酱油店店主

优秀版主

用旋转蒸发仪
▄︻┳═一*▄︻┳═一*众里寻虫千百度,蓦然回首,虫在酱油坛深处!▄︻┳═一*▄︻┳═一*
5楼2008-11-05 12:32:46
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龙行天下8388

新虫 (正式写手)


有爱的日子(金币+1,VIP+0):谢谢您的应助,欢迎常来分析版:)
建议选用内标法,
同时考虑药物是否见光易分解,是否热不稳定等因素。
否则,提取出来后量会损失很多。
6楼2008-11-05 16:39:52
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xiaocao204

金虫 (小有名气)


有爱的日子(金币+1,VIP+0):谢谢您的应助,欢迎常来分析版:)
用乙腈沉淀效果更好
更干净
7楼2008-11-05 23:23:31
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xiehuichun

金虫 (小有名气)

学习了,谢谢各位!
8楼2008-11-06 08:52:48
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Gaos

木虫 (正式写手)

多谢xiaocao204。那么 1ml样品里乙腈加多少?作用多长时间离心?
读博士是为了什么?
9楼2008-11-06 16:56:20
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xiaocao204

金虫 (小有名气)

CSF比较干净,所以做CSF的话1:1就行
10楼2008-11-27 20:11:15
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